光散射技术在食品安全检测及生化药物分析中的应用

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共振光散射(RLS)技术因其灵敏度好、实验仪器简单、检测方便等优点而倍受化学研究者青睐,因而得到飞速的发展,目前,共振光散射技术已成为分析化学领域中强有力的分析技术。本文将RLS进一步深化,用等离子共振光散射(PRLS)技术对环境重金属离子Ag+、食品中致癌物质苏丹红进行定性和定量表征;测定了生化药物肝素;探讨了Co(Ⅱ)与钴试剂5-Cl-PADAB对T碱基的选择性识别,并分析了碳纳米管分散液的积极作用。从实验中获取有用的信息,为RLS技术在临床诊断、环境监测、食品卫生监测等领域的应用提供理论和实验依据。具体研究内容包括以下几个方面:(1)在银纳米粒子形成的基础上,报道了一种在食品中快速检测苏丹红的新方法。苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ由于结构中含有氮氮双键和酚羟基而具有还原性,可以与硝酸银发生氧化还原反应,生成银纳米粒子。颜色由苏丹红的红色变为银纳米粒子的棕色,并且导致等离子共振光散射(PRLS)增强,特征散射峰在452nm,散射信号用普通荧光仪检测。PRLS信号与苏丹红浓度成正比,苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ浓度范围分别为0.2-2.4μmol/L,0.1-2.4μmol/L,0.1-2.4μmol/L和0.2-3.0μmol/L,检出限分别为3.2nmol/L,3.0nmol/L,3.2nmol/L和2.9nmol/L。对实际样品辣椒油的检测,回收率为90.8-103.3%,RSD为4.0-4.9%,且这个结果和HPLC检测的结果一致。机理研究表明,苏丹红的反应基团是酚羟基,而非氮氮双键。(2)肝素是一种黏多糖硫酸脂,医学上主要有抗凝血、抑制血小板、增加血管壁的通透性、调控血管新生、调血脂、抗炎、抗过敏等作用。在NaOH浓度为0.042mol/L的碱性条件下,Co(Ⅱ)与钴试剂5-Cl-PADAB结合生成的配合物带正电荷,肝素带负电,二者可以通过静电作用结合,使得共振光散射(RLS)强度显著增大,最大散射峰位于550nm,散射强度与肝素浓度呈线性关系。基于此,建立了一种定量测定肝素的方法。(3)碱性条件下,在Co(Ⅱ)与钴试剂5-Cl-PADAB形成的配合物溶液中加入A6、G6、C6、T6工作液。实验表明,四者散射变化情况不同,加入A6、G6、C6溶液后,散射强度基本不变化,而加入T6溶液后,散射强度明显增强,且当在体系中加入分散了的碳纳米管(CNTs)后,散射增强更加明显。因此,可以推断,配合物与DNA的作用主要是通过T碱基进行结合的。也就是说,通过实验我们进一步找到了配合物与DNA的结合位点,这对于基因诊断及分析具有非常重要的意义。
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