多巴胺D2类受体对小鼠正常屈光发育及形觉剥夺性近视的作用

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目的:多巴胺(dopamine, DA)已经被证明是参与调控眼球生长发育的一类神经递质。视网膜上的多巴胺D2类受体包括D2受体(dopamine D2 receptor,D2R)和D4受体(dopamine D4 receptor,D4R)。多巴胺D2自受体(dopamineD2 autoreceptor, AutoD2R)是指分布在DA能神经元上的D2R,能通过控制DA神经元的放电、DA的合成及释放而对细胞外的DA水平起着负反馈的调控作用。采用基因敲除联合药物干预的方法系统地研究D2类受体在小鼠正常屈光发育以及形觉剥夺性近视(form deprivation myopia,FDM)中的作用。  方法:⑴D2R对小鼠正常屈光发育以及FDM的作用研究。首先,我们研究D2R激动剂quinpirole对D2R基因敲除(D2KO)小鼠FDM的作用:四周龄的D2KO小鼠和同窝仔野生型小鼠(wild-type, WT)随机分为VC溶剂组、低剂量的quinpirole处理组(1 mg/kg)和高剂量quinpirole组(10mg/kg),所有的小鼠给予四周的持续形觉剥夺及每日腹腔注射溶剂或药物。其次,研究AutoD2KO对小鼠正常屈光发育的影响:四周龄的AutoD2KO小鼠和同窝仔对照鼠D2loxp/loxp给予正常的视觉环境,每隔两周检测体重、屈光、眼轴等生物学参数持续到十周,另外,选取七周龄时给予闪光视网膜电图(electroretinogram, ERG)检测。最后,研究AutoD2KO对小鼠FDM的影响,四周龄的AutoD2KO和D2loxp/loxp分别分为正常对照组和FDM组, FDM组给予四周的持续形觉剥夺。⑵D4R对小鼠正常屈光发育及FDM的作用研究。四周龄C57BL/6小鼠分别分为正常对照组和FDM组这两大组,每大组又分为溶剂组和高低剂量药物组(D4R激动剂PD-168077:1 mg/kg和10 mg/kg;D4R拮抗剂L-745870:1mg/kg和10 mg/kg),所有动物给予两周的正常视觉环境或持续形觉剥夺及每日腹腔注射溶剂或药物,其中,正常对照组在五周龄时给予ERG检测。  结果:①D2R对小鼠正常屈光发育以及FDM的作用研究。首先, D2R激动剂quinpirole对WT小鼠的FDM表现出双向作用:低剂量时抑制FDM(-5.23±0.44 DinWT-VCvs-1.79±0.35 Din WT-1-quinpirole,P<0.05,two-way ANOVA),高剂量时促进FDM(-5.23±0.44 DinWT-VCvs-8.83±0.72 D in WT-10-quinpirole,P<0.05,two-way ANOVA),而这种双向作用在D2KO上消失(P>0.05,two-way ANOVA),表明激动D2R能对小鼠的FDM进展起双向调控的作用。其次,AutoD2KO促进小鼠的正常屈光发育朝近视方向漂移(P=0.029, repeated measures ANOVA),而对角膜曲率半径和眼轴等生物学参数影响不明显(P>0.05,repeatedmeasuresANOVA)。同时,AutoD2KO显著降低了小鼠暗视及明视ERG反应的振幅(P<0.05,repeatedmeasuresANOVA),说明AutoD2KO对小鼠的正常屈光发育影响不显著,同时降低了视网膜的电生理功能。最后,AutoD2KO对小鼠的FDM发展有明显促进的趋势(-5.74±0.44 D inD2loxp/loxp-FDM vs-7.69±0.74 D inAutoD2KO-FDM,P=0.007,repeated measures ANOVA),提示AutoD2R对小鼠的FDM具有保护作用。②D4R对小鼠正常屈光发育及FDM的作用研究。D4R激动剂PD-168077不影响小鼠的正常屈光发育(P>0.05,one-wayANOVA),但是可以促进小鼠的FDM进展(-2.81±0.63 Din FD-DMSOvs-5.57±0.72 D in FD-1PD,P<0.05,one-way ANOVA);D4R拮抗剂L-745870有促进小鼠正常屈光发育往远视方向漂移的趋势(5.48±0.86 D in VCvs7.72±1.05 D in1L,P<0.05,one-wayANOVA),同时可以抑制小鼠的FDM进展(-4.15±0.27 D in FD-VCvs-1.62±0.41 D in FD-1L,P<0.05,one-wayANOVA)。这些结果提示激动D4R可以促进FDM的进展。D4R药物对ERG的影响不明显:D4R激动剂PD-168077和拮抗剂L-745870分别有升高和降低暗视及明视ERG的b波振幅的大小的趋势(P>0.05, repeated measures ANOVA)。整个实验过程中,玻璃体腔深度和眼轴长度的变化和屈光力改变一致。而前房深度、晶状体厚度、角膜曲率半径等参数不受实验因素的影响(P>0.05)。  结论:D2类受体对小鼠的正常屈光发育无显著影响,但是对小鼠的FDM起着重要的调控作用:1)激动D2R能对小鼠的FDM起双向调控的作用。AutoD2R能对小鼠的FDM的进展起着保护作用,并且很可能参与了D2R对FDM的双向调控作用。2)激动D4R能促进小鼠的近视形成。因此,AutoD2R对近视的发生发展起着保护作用,而激动AutoD2R以外的其它D2类受体则促进了近视的发展。
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