【摘 要】
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核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)是油菜、大豆等作物菌核病的病原物,是一种危害性很大的植物病原真菌。真菌病毒是指能够在真菌中复制和增殖的一类病毒,且低毒相关真菌病毒是一种潜在的生防因子。核盘菌中蕴含着丰富的真菌病毒资源。本研究以分离自甘肃和青海两省的核盘菌为研究材料,分析了两地核盘菌群体中的病毒种类,克隆获得了一个全病毒科病毒Ss VV2的基因组全长,分析了Ss VV2的分
【基金项目】
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湖北省重点研发计划项目(项目编号:2021BBA236);
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核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)是油菜、大豆等作物菌核病的病原物,是一种危害性很大的植物病原真菌。真菌病毒是指能够在真菌中复制和增殖的一类病毒,且低毒相关真菌病毒是一种潜在的生防因子。核盘菌中蕴含着丰富的真菌病毒资源。本研究以分离自甘肃和青海两省的核盘菌为研究材料,分析了两地核盘菌群体中的病毒种类,克隆获得了一个全病毒科病毒Ss VV2的基因组全长,分析了Ss VV2的分子特性,并测定了携带Ss VV2的低毒菌株DT-110的生物学特性。此外还评估了低毒菌株ML-10的生防潜力。具体的研究结果如下:分析了我国春油菜区核盘菌中的真菌病毒种类,评估了低毒菌株ML-10的生防潜力。自甘肃省民乐县和青海省大通县两地发病油菜植株上采集核盘菌菌核,共分离纯化获得116个核盘菌菌株。基于宏病毒组分析,鉴定到分离菌株中含有50种真菌RNA病毒,包括15种新病毒。其中+ss RNA基因组病毒占比70%,ds RNA基因组病毒占比18%,-ss RNA基因组病毒占比12%,未检测到DNA病毒。鉴定的病毒主要隶属于葡萄孢欧尔密病毒科、线粒体病毒科、减病毒科、内源病毒科和全病毒科等15个病毒科以及一些分类地位尚未明确的病毒,表明分离自春油菜种植区的核盘菌群体中病毒种类丰富。对低毒菌株ML-10的生防潜力进行评估,发现经菌株ML-10的菌丝液处理活体油菜植株,可有效防控菌核病发生。鉴定了低毒菌株DT-110中的病毒种类,并且克隆了Sclerotinia sclerotiorum victorivirus 2(Ss VV2)的全长c DNA序列。以强毒力菌株1980为对照,发现菌株DT-110的菌落形态不规则、菌丝生长速度慢、菌核数量减少且变小,并且致病力减弱。通过宏病毒组深度测序,明确了菌株DT-110中除了Ss VV2外,还携带隶属于葡萄孢欧尔密病毒科的病毒Sclerotinia sclerotiorum ourmia-like virus 7、丁型线性病毒科的病毒Sclerotinia sclerotiorum deltaflexivirus 3、布尼亚病毒科的病毒Sclerotinia sclerotiorum bunyavirus 6-A等4个病毒以及4个分类地位还未确定的病毒Sclerotinia sclerotiorum ds RNA mycovirus-A、Ss NSRV2、Ss NSRV5和Ss NSRV10。结合RACE技术,获得Ss VV2的全长c DNA序列,Ss VV2基因组全长含有5123个核苷酸(nt),编码两个重叠的开放阅读框(ORF),ORF1编码含有755个氨基酸(aa)的外壳蛋白(CP),ORF2编码834aa的依赖RNA的RNA聚合酶(Rd Rp)。多重比对分析表明Ss VV2的Rd Rp含有8个保守基序,同源性分析表明Ss VV2与已报道的病毒Sclerotinia nivalis victorivirus 1(Sn VV1)有74.7%的相似性,基于Rd Rp和CP分别构建系统发育树,结果支持Ss VV2与Sn VV1聚为一支,为全病毒科(Totiviridae)中维多利亚病毒属(Victorvirus)的成员。本研究探究了来自甘肃省和青海省的核盘菌中的真菌病毒种类,克隆了隶属于全病毒科的新病毒Ss VV2的基因组全长,评估了低毒核盘菌DT-110的生物学特性及低毒核盘菌ML-10的生防潜力。研究结果为核盘菌病毒资源库增添了更多的真菌病毒信息,也为菌核病的防控提供新的生防材料。
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