【摘 要】
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研究目的:采用针刺加大强度运动造成跟腱微损伤模型,利用高通量测序技术和生物信息学方法,分析跟腱m RNA、mi RNA的表达差异,初步筛选特征性m RNA和mi RNA,为进一步理解跟腱微损伤病理机制提供理论依据。研究方法:24只SPF级雌性12周龄SD（Sprague Dawley）大鼠（体重230±15g）,随机分为空白对照组（Con）,针刺后运动组（NE+EX）。NE+EX组采用30G针头经
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研究目的:采用针刺加大强度运动造成跟腱微损伤模型,利用高通量测序技术和生物信息学方法,分析跟腱m RNA、mi RNA的表达差异,初步筛选特征性m RNA和mi RNA,为进一步理解跟腱微损伤病理机制提供理论依据。研究方法:24只SPF级雌性12周龄SD（Sprague Dawley）大鼠（体重230±15g）,随机分为空白对照组（Con）,针刺后运动组（NE+EX）。NE+EX组采用30G针头经皮针刺跟腱,针刺位置为跟腱止点上2cm处。24h后进行上坡跑运动,运动速度为17m/min,在坡度为10°的斜坡上每天1h,每周5d,运动时间为5周,每组9只大鼠取双侧跟腱,用于转录组分析,检测组间m RNA和mi RNA表达差异;其余3只跟腱放入4%多聚甲醛溶液,制作石蜡切片,进行HE染色和阿尔新蓝染色,观察组织病理学改变,并根据转录组结果,采用免疫组化技术对部分跟腱损伤相关因子表达进一步研究。研究结果:（1）组织病理学变化,与Con组相比,HE染色显示NE+EX组椭圆形腱细胞增多,细胞密度显著增加,局部细胞聚集,尤其以针刺周围更为明显,腱纤维排列紊乱;阿尔新蓝染色显示损伤局部存在软骨化表现。（2）mRNAs转录组分析表明,与Con组相比,NE+EX组99个显著差异表达的mRNAs,其中21个m RNAs表达显著上调,78个m RNAs表达显著下调。与跟腱损伤密切相关的m RNAs中,Podnl和ADAMTS8表达显著上调,Nrcam、Synpo2l、Angpt4和MMP-3表达显著下调。免疫组化结果表明Podnl和ADAMTS8表达明显增高。（3）miRNAs转录组分析表明,与Con组相比,NE+EX组15个显著差异表达的miRNAs,其中7个mi RNAs表达显著上调,8个mi RNAs表达显著下调。研究结论:（1）跟腱针刺加大强度运动5周后,跟腱组织出现明显病理性改变,局部出现软骨化样改变。（2）转录组分析筛选出99个显著差异表达的mRNAs,首次观察到跟腱微损伤后Podnl基因可能参与跟腱组织软骨化过程;ADAMTS8参与蛋白多糖的代谢调节;另外Nrcam、Synpo2l、Angpt4和MMP-3等基因在跟腱病理过程中的作用有待进一步研究。（3）转录组分析结果提示15个miRNAs可能参与跟腱微损伤后基因表达调控。
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