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花色苷由于其资源丰富,安全无毒,而且具有一定的营养和药理作用,在食品、化妆、医药等方面有巨大的应用潜力。近年来,国内外对花色苷抗氧化、抗突变、保护肝脏、抑制肿瘤细胞发生等多种生理功能都有不少研究报道,但是关于花色苷的降血脂功效的动物试验并不多见。本文以紫心红薯为原料,以二次回归正交旋转对其提取工艺进行优化;比较了酸碱、温度、金属离子、食品添加剂对PSPA(紫心红薯花色苷)、MA(桑椹花色苷)、LPA(荔枝皮花色苷)的稳定性的影响,采用试剂盒的方法比较了PSPA、MA、LPA三种植物来源花色苷的体外抗氧化活性,评价了三种植物来源花色苷对高脂血症SD大鼠的降血脂功效,试验结果如下:
(1)PSPA提取工艺的优化。PSPA的提取受温度、时间、料液比的影响。采用二次回归正交旋转组合设计对PSPA的提取进行分析,优化出PSPA的最佳提取工艺为:温度80℃,提取时间2.5h,料液比1:34(w/v),此条件下PSPA得率为28.79mg/lOOg,各因素对提取率的影响大小依次为:提取温度>料液比>提取时间。
(2)三种植物来源花色苷稳定性的比较。三种植物来源花色苷都容易受酸碱影响,其中LPA对酸碱最敏感,在pH2时溶液颜色即发生改变;在60℃和80℃下MA和PSPA都比较稳定,而在100℃下稳定性较差,LPA容易受温度影响,热稳定性最差。
七种金属离子Fe3+、Fe2+、ca2+、Mg2+、Cu2+、A13+、Na+中,Fe3+和Fe2+可降低PSPA溶液的吸光值,MA的稳定性不受Mg2+影响,容易受到其它6种金属离子的不良影响,其中Fe3+的影响最大,A13+、Cu2+会使LPA的吸光值显著增加,Fe2+、Fe3+则使它吸光值显著下降,而其它三种金属离子对LPA吸光值影响并不显著。
H202及Na2S03两种物质的存在会严重影响三种植物来源花色苷的稳定性;浓度低于15%的蔗糖和葡萄糖的存在会使PSPA和MA的稳定性增强,蔗糖和葡萄糖则会影响LPA的稳定性。
质量分数低于0.1%的苯甲酸钠和山梨酸钾溶液会使PSPA的吸光值增大,而使LPA吸光值降低,MA几乎不受常用的防腐剂苯甲酸钠和山梨酸钾的影响;Vc对三种植物来源的花色苷有双重影响,加热前会使花色苷的稳定性增加,而加热后则会促进其降解影响其稳定性,其中受影响最大的是MA,而PSPA和LPA则比较稳定。
(3)三种植物来源花色苷体外抗氧化能力的比较。对三种植物来源花色苷的总酚及花色苷含量进行分析,发现总酚含量最高的是MA为335.3 mg/g最低是PSPA为191.9mg/g,LPA居中为242.0mg/g。花色苷的含量MA为38.7mg/g,PSPA为8.6mg/g,LPA为12.6mg/g。
采用试剂盒的方法测定三种植物来源花色苷的体外抗氧化活性。总抗氧化能力最高的是LPA为857.8U/mg其次是MA为486.9U/mg、PSPA最低为265.8U/mg。清除超氧阴离子能力是MA最高可达到349 U/mg,其次是LPA为408.4 U/mg,PSPA最低为349 U/mg,清除羟自由基的能力最高的是MA为可达160.5U/mg,PSPA为125.0 U/mg,LPA为112.5 U/mg。
(4)三种植物来源花色苷体内降血脂及抗氧化功效的评价。比较了PSPA、MA、LPA对高脂血症SD大鼠的降血脂和抗氧化能力。三种植物来源花色苷均能显著降低高脂血症大鼠TC、LDL-C水平,组间并无显著差异(p>0.05);三种植物来源花色苷均能显著降低TG水平,作用效果LPA >MA>PSPA,三种植物来源花色苷均能提高HDL-C水平,其中MA和LPA效果显著(p<0.05),PSPA则效果不显著(p>0.05)。在降低动脉粥样硬化指数方面,就AI1来讲,三种植物来源花色苷均可使其显著降低并达到与脂必妥药物组同样的效果,其中LPA和MA效果较PSPA的要明显(p<0.05)。各治疗组均可使AI2显著降低,并且组间无差异(p>0.05)。三种植物来源花色苷均能显著地提高高脂血症大鼠血清的T-AOC水平(p<0.05),其中对于提高肝脏T-AOC水平,PSPA的效果要明显低于MA和LPA(P<0.05)。三种植物来源花色苷均能显著地提高高脂血症大鼠的GSH-Px水平(p<0.05),PSPA的效果要明显低于MA和LPA(p<0.05)。三种花色苷均能显著提高血清和肝脏中SOD活性降低MDA含量(p<0.05)。