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目的Ig A肾病是一组以肾小球系膜区Ig A或以Ig A沉积为主的临床病理综合征,近年来在儿童中的患病率明显升高,约25%-30%的患者于20-25年后可发展为终末期肾病,严重危害了人类的健康。目前本病的发病机理还不明确。肾脏病理的级别决定了Ig A肾病的预后。评估肾损伤的方法主要包括尿液分析、肾功能、影像学诊断及病理学诊断等,其中肾脏病理学检查是是诊断Ig A肾病且评估Ig A肾病病理级别的金标准,因其存在创伤性,不宜作为临床随访的指标;临床随访依据肾功能、尿蛋白含量等指标评估临床转归情况,但均不能很好的评估肾脏病理转归及进展情况。循环纤维细胞是一种骨髓起源的,生理状态下在血液中少量存在,机体受到损害后,能在趋化因子的作用下,被募集到损伤部位,并特异性分化成功能活跃的肌成纤维细胞,分泌细胞外基质,促进纤维化的形成和发展。已有多个研究证实[25-31],循环纤维细胞参与肾间质纤维化、肾动脉狭窄、急性肾损伤向慢性肾脏疾病转化等疾病的发生发展,但循环纤维细胞是否参与Ig A肾病的发生发展,目前尚未见报道。“牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳(BSA+LPS+CCl4)”方法是目前公认的建立Ig A肾病的模型之一,本文通过探讨循环纤维细胞在Ig A肾病慢性进展过程中的变化,寻找循环纤维细胞与Ig A肾病进展之间的关联,以期为临床治疗及远期预后提供临床依据。方法1.本实验应用2-4周SD大鼠42只,体重(180±20)g,对照组(n=21)只,Ig A肾病模型组(n=21)只、;采用“BSA+LPS+CCl4”方法建立Ig A肾病模型。2.于造模前第1周及造模后第6周、第8周及第10周应用大鼠代谢笼留取两组24小时尿,并分批(每组7只大鼠)于第6周、第8周及第10周麻醉后行经右心室取血、切取左侧肾脏。肾脏组织放置10%福尔马林中固定,制作蜡块后,待行HE染色、PAS染色及免疫荧光染色。3.取各组抗凝血标本,采用流式细胞术检测外周血循环纤维细胞水平。4.应用SPSS21.0软件对结果进行分析,定量数据采用均数±标准差(?x±s)表示,两组间数据采用独立样本t检验,三组数据采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD方法;变量资料相关性分析采用spearman相关系数,P<0.05为差异具有统计学意义。结果1.24小时尿蛋白定量:第1周对照组与Ig A肾病模型组间,尿蛋白定量差异无统计学差异(t=0.67,P>0.05);第6周、第8周及第10周,Ig A肾病模型组尿蛋白定量高于同周龄对照组,差异均有统计学差异(P<0.05)。Ig A肾病模型组中第6周、第8周、第10周与第1周比较,差异均有统计学意义(P<0.05),但第6周、第8周与第10周两两比较均无统计学差异(P>0.05);对照组组内两两比较差异均无统计学差异(P>0.05)。2.外周血循环纤维细胞水平:Ig A肾病模型组与同周龄对照组相比,外周血循环纤维细胞水平升高,差异有统计学意义。Ig A肾病模型组组内两两比较,外周血循环纤维细胞水平逐渐升高,差异均有统计学意义(F=104.54,P<0.05);对照组组内两两比较,差异无统计学意义(F=0.61,P=0.55)。3.肾脏病理:HE染色及PAS染色显示:对照组肾小球及肾小管结构大致正常,系膜细胞无明显增生,系膜基质基本正常;Ig A肾病模型组肾小球系膜细胞有不同程度的增生,随着造模时间的延长,增生逐渐加重。4.Ig A免疫荧光染色:IgA肾病模型组与同周龄对照组相比,IgA沉积强度差异均有统计学意义(P<0.05);对照组组内两两比较,差异无统计学意义(F=1.047,P>0.05),而Ig A肾病模型组,Ig A沉积强度逐渐增强,两两比较差异均有统计学意义(F=45.894,P<0.05)。5.循环纤维细胞在肾脏组织中的表达:IgA肾病模型组与同周龄对照组相比,循环纤维细胞表达水平明显高于对照组,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);随着造模时间的延长,Ig A肾病模型组中循环纤维细胞表达水平呈上升趋势,组内两两比较差异均有统计学意义(F=60.422,P<0.05);对照组内两两比较差异均无统计学意义(F=0.817,P>0.05)。6.外周血循环纤维细胞水平与24小时尿蛋白量、Ig A在肾脏组织的平均荧光强度值、循环纤维细胞在肾脏组织的表达的平均荧光强度值之间的相关性:Ig A肾病模型组外周血循环纤维细胞与24小时尿蛋白量无显著相关性(r=0.018,P=0.939),与肾脏组织Ig A沉积强度、循环纤维细胞在肾组织中的表达强度呈显著正相关,相关系数分别为0.974和0.982(P<0.05)。7.Ig A肾病模型组循环纤维细胞在肾脏组织表达的平均荧光强度值与Ig A在肾脏组织的平均荧光强度值的相关性:二者呈显著正相关性(r=0.986,P<0.05)。结论1.循环纤维细胞参与了大鼠Ig A肾病的发生发展过程;2.外周血及肾组织中循环纤维细胞的动态变化在一定程度上反映了大鼠Ig A肾病的肾脏病理严重程度。