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本研究首先针对criptomRNA编码区特点,采用化学方法合成了12个小干扰核糖核酸分子(smallinterferingRNA,siRNA)。其次采用实时定量PCR筛选出2个效果最好的siRNA。为深入探讨所设计合成siRNA对结肠癌细胞的生物学行为的影响,本研究观察了siRNA转染对结肠癌细胞端粒酶活性和人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)的影响,转染siRNA对结肠癌细胞侵袭、失巢凋亡和蛋白激酶B(Akt)磷酸化的影响。结果发现,criptosiRNA可抑制结肠癌细胞的端粒酶活性和下调hTERT,且呈浓度和时间依赖性。CriptosiRNA可抑制结肠癌细胞穿膜细胞数,诱导失巢凋亡,抑制Akt磷酸化水平。
结论:1化学合成的、针对criptomRNA编码区的siRNA具有高效性和特异性;2criptosiRNA可抑制结肠癌细胞端粒酶活性,可能与下调hTERT有关;3criptosiRNA可抑制结肠癌细胞侵袭能力,诱导失巢凋亡,可能与抑制Akt磷酸化水平有关。