三株地衣放线菌抗菌活性次生代谢产物的研究

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微生物生产的抗生素对人类的健康事业做出了重要的贡献,其中放线菌是发现药物先导化合物的重要来源。随着放线菌药物资源的长期开发和利用,尤其从土壤放线菌中分离出大量重复菌株和化合物,越来越不容易发现活性新结构物质。地衣放线菌是寻找活性新化合物的一类新资源。地衣是由地衣型真菌与藻类或蓝细菌形成的共生体,是一类独特的生物类群。目前,国内外对地衣放线菌资源的研究很少,且仅有少量有关地衣放线菌活性代谢产物的报道。本论文开展了该方面的研究,以期从地衣放线菌这类新资源中发现具有生物活性的化合物。本论文使用四种培养基对15株地衣放线菌进行TLC化学多样性筛选和抗菌活性筛选,优选了3株菌(1株拟无枝酸菌Amycolatopsissp.YIM1130687和2株链霉菌Streptomyces sp.YIM130932、Streptomyces sp.YIM130896),开展了次级代谢产物及抗菌活性的研究。采用多种分离手段和有机波谱解析的方法,共分离鉴定了22个化合物。从链霉菌YIM130932的发酵产物中共分离鉴定了 6个化合物,分别为7-0-methylkoninginin D(1),koninginin E(2),cyclo-(Gly-Phe)(3),cyclo-(Phe-Tyr)(4),cyclo-(Leu-Tyr)(5),cyclo-(Ala-Leu)(6)。从链霉菌YIM130896的发酵产物中分离鉴定了2个聚酮化合物,resistomysin(7)和tetracenomycin D(8)。从菌株YIM130687的发酵液中纯化并鉴定了 14个化合物,分别为4-(3-methylbut-2-enyloxy)benzamide(9),2-carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone(10),manalin(11),1H-pyrrole-2-carboxamide.(12),cyclo-(Gly-Ala)(13),cyclo(L-Pro-L-Leu)(14),benzeneacetamide(15),turnagainolide B(16),uracil(17),2-hydroxy-3-methyl-4-pyrone(18),anthranilic acid(19),genistein(20),prunetin(21),(3S)-3-methyl-2,6-piperazinedione(22)。化合物1和2属于康宁霉素(koninginin)类衍生物,该类化合物主要由木霉属真菌产生,本研究为首次从放线菌获得。化合物9,10和18为首次从微生物资源中发现,之前仅来源于高等植物。部分化合物抗菌活性检测表明,有7个化合物对4种病原真菌和3种病原细菌中的一种或多种有明显的抗菌活性。化合物7对MRSA、S.aureus、S.typhimurium,C.albicans、F.graminearum和B.cinerea具有十分显著的抗菌活性,其MIC值分别为1、1、1、32、1和1 μg/ml。化合物10能够显著地抑制三种细菌病原菌(MRSA、S.aureus和 S.typhimurium)和三种真菌病原菌(C.albicans、F.graminearu 和 B.cinerea)的生长,MIC值分别为2,2,16,32,1 和 1 μg/ml。本论文的研究表明,地衣放线菌能够产生结构类型多样的次生代谢产物,其中有3个化合物为首次通过微生物发酵获得,提供了新的天然来源;并发现放线菌能够产生康宁霉素类化合物。
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