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目的:建立家兔后肢三阳经五输穴定位基础数据,为家兔腧穴定位国家标准化提供帮助。
方法:健康新西兰兔30只。先类比人体腧穴定位参照WHO标准与国家标准对10只新西兰兔左右两侧后肢三阳经五输穴进行比拟定位,然后麻醉剃毛备皮,处死动物后行后肢血管灌注,手术显微镜下解剖定位后的穴区及毗邻处解剖学结构,用脊椎动物比较解剖学方法确定与人体同源同功肌肉、血管和神经,校正腧穴定位。在10只新西兰兔上采用多用电子穴位测定治疗仪协助确定.上述各穴定位的准确性并标记,在手术显微镜下逐一对腧穴进行层次解剖,观察并测量腧穴与周围组织结构的毗邻关系。在此基础上明确各腧穴定位法与取穴法。
对10只新西兰兔进行耳缘静脉注射麻醉,双侧后肢去毛备皮,后摆正至家兔五输穴取穴法体位,并用记号笔标记五输穴。在腹主动脉进行双侧下肢的10%甲醛溶液灌注,直至下肢僵硬。再次确定腧穴后取材,以家兔双侧后肢三阳经五输穴穴区组织3mm×3mm×2mm以及旁开6~8mm左右的非经非穴区穴区组织3mm×3mm×2mm,以家兔臀部非经非穴区组织3mm×3mm×2mm作为远端对照组。将所取组织置于4%多聚甲醛溶液中固定24-48h。常规脱水透明石蜡包埋后切片,HE染色、Masson三色改良染色以及Cx43、NSE免疫组织化学染色,镜下观察穴区组织结构、胶原纤维形态与量的变化以及兔穴区与非经非穴区皮肤组织Cx43、NSE蛋白定位及半定量表达。
结果:(1)解剖学研究:足三里、解溪、陷谷、厉兑、阳陵泉、阳辅、丘墟、足临泣、足窍阴、委中、昆仑、至阴定位方法与正常人体腧穴定位较为一致。冲阳,在后肢足背,第2跖骨基底部与第二跗骨骨关节处;内庭,后肢足背,第2、第3趾间,趾蹼缘后方毛发交界处(即赤白肉际);侠溪,后肢足背,第4、第5趾间,趾蹼缘后方毛发交界处(即赤白肉际);京骨,在跖区,第5跖近端结节前下方毛发交界处;束骨,在兔跖区,第5跖趾关节的近端,毛发交界处;足通谷,在足趾,第5跖趾关节的远端,毛发交界处(即赤白肉际).
(2)组织学研究:HE染色发现,家兔后肢三阳经穴区、近端非经非穴区与远端非经非穴区无明显差异。Masson改良三色中,厉兑、内庭、陷谷、冲阳与近端和远端非经非穴区比较均有统计学意义(P<0.05),足窍阴与近端非经非穴区比较有统计学意义(P<0.05),阳陵泉与远端非经非穴区比较有统计学意义(P<0.05)。免疫组化Cx43中,足三里穴、阳陵泉、至阴与近端和远端非经非穴区比较均有统计学意义(P<0.05),厉兑、解溪、足窍阴与近端非经非穴区统计比较有统计学意义(P<0.05),侠溪、委中与远端非经非穴区比较有统计学意义(P<0.05)。免疫组化NSE中,冲阳、解溪和足三里、足窍阴、阳陵泉与近端和远端非经非穴区统计比较均有统计学意义(P<0.05),至阴和委中与近端非经非穴区统计比较有统计学意义(P<0.05),厉兑、内庭、侠溪、足临泣、丘墟、阳辅、足通谷、昆仑与远端非经非穴区比较有显著统计学意义(P<0.01)。
结论:家兔后肢三阳经五输穴中高信度腧穴为厉兑、解溪(追风)、足三里、足窍阴、阳陵泉、至阴,中信度腧穴为内庭、陷谷、冲阳、侠溪、委中,低信度腧穴为足临泣、丘虛、阳辅、昆仑。与十三五余曙光版《实验针灸学》中的家兔腧穴图谱相比较,厉兑、解溪(追风)、足三里、至阴、足窍阴、阳陵泉为本次实验的高信度腧穴,家兔腧穴图谱中的委中为本次实验的中信度腧穴,昆仑和阳辅均为本次实验的低信度腧穴。胃经中的内庭、陷谷、冲阳,胆经中的侠溪、足临泣是本次试验研究发现在家兔腧穴图谱未记载描述的穴位。
方法:健康新西兰兔30只。先类比人体腧穴定位参照WHO标准与国家标准对10只新西兰兔左右两侧后肢三阳经五输穴进行比拟定位,然后麻醉剃毛备皮,处死动物后行后肢血管灌注,手术显微镜下解剖定位后的穴区及毗邻处解剖学结构,用脊椎动物比较解剖学方法确定与人体同源同功肌肉、血管和神经,校正腧穴定位。在10只新西兰兔上采用多用电子穴位测定治疗仪协助确定.上述各穴定位的准确性并标记,在手术显微镜下逐一对腧穴进行层次解剖,观察并测量腧穴与周围组织结构的毗邻关系。在此基础上明确各腧穴定位法与取穴法。
对10只新西兰兔进行耳缘静脉注射麻醉,双侧后肢去毛备皮,后摆正至家兔五输穴取穴法体位,并用记号笔标记五输穴。在腹主动脉进行双侧下肢的10%甲醛溶液灌注,直至下肢僵硬。再次确定腧穴后取材,以家兔双侧后肢三阳经五输穴穴区组织3mm×3mm×2mm以及旁开6~8mm左右的非经非穴区穴区组织3mm×3mm×2mm,以家兔臀部非经非穴区组织3mm×3mm×2mm作为远端对照组。将所取组织置于4%多聚甲醛溶液中固定24-48h。常规脱水透明石蜡包埋后切片,HE染色、Masson三色改良染色以及Cx43、NSE免疫组织化学染色,镜下观察穴区组织结构、胶原纤维形态与量的变化以及兔穴区与非经非穴区皮肤组织Cx43、NSE蛋白定位及半定量表达。
结果:(1)解剖学研究:足三里、解溪、陷谷、厉兑、阳陵泉、阳辅、丘墟、足临泣、足窍阴、委中、昆仑、至阴定位方法与正常人体腧穴定位较为一致。冲阳,在后肢足背,第2跖骨基底部与第二跗骨骨关节处;内庭,后肢足背,第2、第3趾间,趾蹼缘后方毛发交界处(即赤白肉际);侠溪,后肢足背,第4、第5趾间,趾蹼缘后方毛发交界处(即赤白肉际);京骨,在跖区,第5跖近端结节前下方毛发交界处;束骨,在兔跖区,第5跖趾关节的近端,毛发交界处;足通谷,在足趾,第5跖趾关节的远端,毛发交界处(即赤白肉际).
(2)组织学研究:HE染色发现,家兔后肢三阳经穴区、近端非经非穴区与远端非经非穴区无明显差异。Masson改良三色中,厉兑、内庭、陷谷、冲阳与近端和远端非经非穴区比较均有统计学意义(P<0.05),足窍阴与近端非经非穴区比较有统计学意义(P<0.05),阳陵泉与远端非经非穴区比较有统计学意义(P<0.05)。免疫组化Cx43中,足三里穴、阳陵泉、至阴与近端和远端非经非穴区比较均有统计学意义(P<0.05),厉兑、解溪、足窍阴与近端非经非穴区统计比较有统计学意义(P<0.05),侠溪、委中与远端非经非穴区比较有统计学意义(P<0.05)。免疫组化NSE中,冲阳、解溪和足三里、足窍阴、阳陵泉与近端和远端非经非穴区统计比较均有统计学意义(P<0.05),至阴和委中与近端非经非穴区统计比较有统计学意义(P<0.05),厉兑、内庭、侠溪、足临泣、丘墟、阳辅、足通谷、昆仑与远端非经非穴区比较有显著统计学意义(P<0.01)。
结论:家兔后肢三阳经五输穴中高信度腧穴为厉兑、解溪(追风)、足三里、足窍阴、阳陵泉、至阴,中信度腧穴为内庭、陷谷、冲阳、侠溪、委中,低信度腧穴为足临泣、丘虛、阳辅、昆仑。与十三五余曙光版《实验针灸学》中的家兔腧穴图谱相比较,厉兑、解溪(追风)、足三里、至阴、足窍阴、阳陵泉为本次实验的高信度腧穴,家兔腧穴图谱中的委中为本次实验的中信度腧穴,昆仑和阳辅均为本次实验的低信度腧穴。胃经中的内庭、陷谷、冲阳,胆经中的侠溪、足临泣是本次试验研究发现在家兔腧穴图谱未记载描述的穴位。