人髓核细胞体外培养及冻存的实验研究

被引量 : 0次 | 上传用户:youi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:(1)研究颈椎前路手术术式所取髓核组织中髓核细胞生物学特性,及用于椎间盘髓核组织工程学种子细胞的可行性。(2)探讨适合组织工程学种子细胞的髓核细胞的代次。(3)研究冻存复苏处理是否影响髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白合成及细胞增殖。方法:(1)采用酶消化法提取经颈椎前路手术中取出的人颈椎间盘髓核组织中髓核细胞。(2)对髓核细胞进行体外培养,应用倒置显微镜观察细胞形态变化及生长情况,应用Ⅱ型胶原蛋白免疫组化法对细胞爬片的细胞进行鉴定。(3)应用Image-Pro Plus6.0软件测量传1至5代次髓核细胞免疫组化照片平均光密度,从而观察胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量的差异。(4)按细胞是否做冻存复苏处理分为A、B两组,A组细胞于-80℃冰箱中冻存2周后复苏的细胞,B组细胞为未经冻存复苏的细胞。应用MTT法分别测量A、B两组OD值,从而观察A、B两组髓核细胞的增殖活力的差异。应用Image-Pro Plus6.0软件对A、B两组髓核细胞免疫组化照片进行平均光密度测量,从而观察在冻存对髓核细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量差异的影响。结果:(1)采用酶消化法可成功分离并培养出人髓核细胞,传1至2代细胞形态呈短梭型、三角形或多边形,传3代以后,细胞形态逐渐变为长梭型;(2)Ⅱ型胶原蛋白免疫组化测得平均光密度值,传1与2代比较差异无统计学意义(P>0.05),传3、4、5代与传1代相比差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)A组细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白免疫组化测得平均光密度值较B组细胞无明显统计学差异(P>0.05),A组细胞较B组细胞MTT法测OD值无明显统计学差异(P>0.05)。结论:(1)经颈椎前路手术术式取得的髓核组织,可体外培养出的髓核细胞,并可获得传代细胞。(2)传1、2代髓核细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量差异较小,细胞形态分化不明显,适宜做髓核组织工程学种子细胞。(3)冻存复苏处理未能使髓核细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量减少,细胞增殖活力亦未降低。
其他文献
本课题首先研究了固溶温度对核电用2205双相不锈钢合金元素相间分配及其抗腐蚀性能。并在此基础上对其600℃-1000℃范围内σ相的析出行为及其对合金组织性能的影响进行系统研
目的 观察脑缺血后,针刺对脑缺血大鼠额叶皮质Bcl-2、Bax表达的影响,为揭示针刺治疗脑缺血的机制提供实验依据,也为临床针刺治疗脑缺血提供参考。 方法 用雄性SD大鼠采
随着序列模式挖掘技术的不断发展,加权序列模式已被广泛应用到生物医学、经济、网络等领域,成为数据挖掘领域中的一个研究热点。而在一般的加权序列模式挖掘算法中通常使用预先
目的:探讨高压氧综合治疗在神经性耳聋中的应用价值。方法:将63例诊断为神经性耳聋的患者随机分为两组,两组均使用常规药物治疗。治疗组在药物治疗基础上又加高压氧(HBO)治疗
<正>2012年考研试卷的阅卷工作仍然参照去年的新模式,对试卷先扫描,再在电脑上进行批阅。该模式省时高效,也方便了各级阅卷组长对阅卷质量、进度的监控。作为参加过近10年考
目的观察中医辨证论治对功能性消化不良(FD)患者焦虑、抑郁状态的影响。方法采用随机、双盲、多中心、安慰剂对照临床研究。收集273例FD患者,根据中医辨证论治将FD患者分为湿
:从病名、病因病机、辨证分型、治疗规律等诸方面 ,对胆汁反流性胃炎的中医研究现状和进展进行了评述。认为今后应在胆汁反流性胃炎的中医病名研究 ,建立完整客观的诊断指标
本研究对全国2929名大学生进行问卷调查,考察大学生主动性人格对生涯适应力的影响机制。结果表明:大学生主动性人格可正向预测生涯适应力;大学生职业探索在主动性人格与生涯
目的:观察电项针与电针对成年雄性大鼠脑缺血后水通道蛋白4及脑水含量的影响,并比较电项针与电针之间的作用差别,探讨电项针治疗大鼠脑缺血后脑水肿的可能机制。方法:将大鼠随机
自20世纪80年代开始,全球经济一体化和现代物流业的高速发展极大程度地推动了港口物流业的发展。作为港口大国,我国的上海港、深圳港、舟山港、青岛港、天津港都已名列世界级大