【摘 要】
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目的:建立人子宫内膜细胞体外培养模型,探讨BPA对人子宫内膜细胞SGK1表达的影响,为进一步研究BPA是否通过SGK1干扰子宫内膜容受性而导致不孕提供依据。材料与方法:构建人子宫
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目的:建立人子宫内膜细胞体外培养模型,探讨BPA对人子宫内膜细胞SGK1表达的影响,为进一步研究BPA是否通过SGK1干扰子宫内膜容受性而导致不孕提供依据。材料与方法:构建人子宫内膜细胞体外混合培养方法;实验设对照组及BPA组。对照组使用常规DEME/F12培养液;BPA组分为3组,分别为DEME/F12培养液中加终浓度为0.01ug/mlBPA、0.1ug/mlBPA、lug/mlBPA。BPA 干预时间为 24 小时。检查细胞形态,同时进行角蛋白和波形蛋白免疫荧光染色,为实验的进行提供体外混合人子宫内膜细胞。利用免疫荧光方法测定4组SGK1蛋白表达情况。通过荧光定量PCR技术,检测4组子宫内膜细胞上基因SGK1的mRNA表达水平。结果:离体培养的人子宫内膜细胞,接种24 h后细胞大多能贴壁。上皮细胞角蛋白呈阳性表达,波形蛋白呈阴性表达;间质细胞波形蛋白呈阳性表达,角蛋白表达阴性。人子宫内膜细胞存在SGK1表达。免疫荧光结果提示,随着BPA暴露浓度的增加,SGK1蛋白荧光强度逐渐下降。RT-PCR结果提示,BPA下调子宫内膜细胞SGK1 mRNA的表达。结论:BPA影响子宫内膜细胞SGK1蛋白及mRNA的表达,提示BPA暴露可能影响子宫内膜容受性。
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