平贝母(Fritillaria ussuriensis Maxim)作为重要的中药材之一,具有清热润肺、化痰止咳、散结消肿之功效,历来备受中医的重视。因其独特的生长环境和较长的生长周期,致使平贝母价格昂贵,产量较少,另外,人为过渡采挖造成该品种的野生资源濒临灭绝,而通过植物组织培养的方法可有效解决此问题。本研究以平贝母茎段为外植体,诱导激素自养型愈伤组织。再以激素自养型培养物为材料通过秋水仙素浸泡法处理,诱导获得平贝母四倍体,并对其进行多种方法的鉴定。将获得的二倍体和四倍体平贝母鳞茎进行栽培,获取再生植株。同时对平贝母二倍体和四倍体培养过程中各个阶段的生理生化指标进行研究。根据实验研究结果如下：1.平贝母愈伤组织诱导的最适条件为：以茎段为外植体,MS+2,4-D2.5mg/L为基本培养基,19℃条件下黑暗培养,效果较好；2.平贝母激素自养型培养体系的建立：将平贝母愈伤组织接种到激素浓度减半的培养基中,继代2-3次后,再转入到MS无激素的培养基中培养,获得平贝母无激素培养物,在黑暗条件下长势仍保持良好状态。3.平贝母四倍体诱导的最适条件为：秋水仙素浸泡法,秋水仙素浓度500mg/L,处理时间24h。4.细胞水平及形态学观察：平贝母二倍体染色体2n=22,四倍体染色体4n=44；四倍体为巨大型；并且通过流式细胞仪分析。5.生理生化指标的变化：可溶性总糖在平贝母形态发生过程中其含量呈现一个下降-上升-下降-上升的过程；淀粉的总含量则出现一个稳步积累的趋势；过氧化氢酶活力在整体水平上先下降后升高,在愈伤组织形成小鳞茎和完整植株的形成时期过氧化氢酶出现了两个高峰；过氧化物酶的酶活力整体水平较高；苯丙氨酸解氨酶只有在鳞茎到植株形成阶段活力旺盛。总体水平上,四倍体的各项指标均高于二倍体。6.内源激素：GA在平贝母离体条件下主要起到打破休眠的作用,促进小鳞茎的形成,促进淀粉酶的生成,通过淀粉的分解提供能量；IAA在贝母鳞茎的生长过程和根的形成中作用明显；ABA在鳞茎形成后开始积累,为后期进入休眠进行积累；ZR参与了鳞茎的形成,同时ZR与IAA协同作用促进了叶和根的形成。四类内源激素会联合作用于平贝母的生长发育。7.生物碱的测定：组培平贝母各时期生物碱含量接近或略高于平贝母生药,且各时期处于平稳增长状态,四倍体平贝母的生物碱含量高于二倍体平贝母。