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皂芪丸是由皂角刺、黄芪、龙牙楤木三味药材组成的复方制剂,具有消肿散结、益气扶正等功效。主要用于治疗结肠癌、直肠癌等实体肿瘤。本研究对皂芪丸的制备工艺、质量标准、稳定性、药效学及毒性进行了系统地考察。1.皂芪丸的制备工艺研究根据三味药材主要有效活性成分的理化性质,通过预实验,确定将3/4倍处方量的龙牙楤木打粉备用,剩余的1/4与皂角刺、黄芪水煎。分别以单因素实验考察水煎药材的浸泡时间和筛选附加剂,优选出浸泡时间为1h,附加剂为20%淀粉浆。分别采用L9（34）正交试验对水煎工艺和干燥工艺进行考察,水煎工艺以加水量,煎煮时间,煎煮次数为考察因素,以君药中主要药效成分槲皮素含量、干膏收率综合评分为评价指标,得到优化的水煎工艺:8倍量水,煎煮2次,每次1.5h;干燥工艺则考察了干燥温度、干燥时间、物料厚度对皂芪丸的水分含量和溶散时限的影响,得到优化的干燥工艺:70℃,干燥24h,厚度2cm。分别按10倍处方量进行三批中试试验,产品的平均收率为98.87%,表明皂芪丸的制备工艺基本稳定。2.皂芪丸质量标准的研究分别以槲皮素对照品、黄芪甲苷对照品、龙牙楤木对照药材作对照,建立皂芪丸中皂角刺、黄芪、龙牙楤木薄层色谱鉴别的方法。根据《中国药典》2015年版的相关规定进行检查,三批中试样品的检查结果均符合要求。采用HPLC法测定皂芪丸中槲皮素和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,分别对它们的HPLC条件进行考察。经过系统的方法学考察,槲皮素与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的平均加样回收率分别为96.20%、96.45%,RSD分别为4.14%、2.79%;重复性的RSD分别为2.37%、3.50%。结果表明这两种有效成分的含量测定方法重复性均良好。3.皂芪丸初步稳定性研究参照《中国药典》2015版四部丸剂项下规定等,以性状、鉴别、水分、崩解时限、微生物限度、含量测定为重点考察项目,对皂芪丸的三批中试样品进行加速稳定性试验考察（0、1、2、3、6个月）及长期稳定性试验考察（0个月、3个月、6个月、9个月、12个月）,分别与0月比较。试验结果发现各项指标均无明显变化,表明皂芪丸的稳定性良好,所以暂定其有效期为18个月。4.皂芪丸的药效学及急性毒性研究4.1.皂芪丸的药效学研究复制裸鼠人结肠癌HCT116移植瘤模型,采用免疫组化法分析瘤体内微血管密度（microvessel density,MVD）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。结果发现各治疗组给药后,肿瘤体积、相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率明显下降,与对照组比较,P<0.05;皂芪丸治疗组微血管分布较稀疏,MVD和阳性表达率均降低。由此可以得出结论,即皂芪丸能明显抑制裸鼠HCT116移植瘤的生长,降低移植瘤MVD值,下调瘤组织VEGF的表达,揭示其抗肿瘤作用可能与减少血管生成有关。4.2.皂芪丸的急性毒性研究预实验发现,无法测出半数致死量(median lethal dose,LD50);所以采用最大耐受剂量法（Maximal tolerance dose,MTD）进行测定。小鼠的MTD为12g/kg,而且体重无明显变化,无死亡。14d后处死,肉眼观察其主要脏器未见异常。说明皂芪丸对小鼠的急性毒性低,在规定剂量下服用安全可靠。