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芽孢杆菌属细菌能产生多种抗菌物质,对于植物病虫害的生物防治方面应用较为广泛。本文应用侧孢短芽孢杆菌B1-21和枯草芽孢杆菌HNDF2进行混合发酵,对比分析了单菌发酵和混菌发酵代谢产物的抑菌效果,分别测定单菌发酵液与混菌发酵液的菌体密度和代谢产物浓度。通过CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G75凝胶过滤层析从混菌发酵代谢产物中分离出了对于尖孢镰刀菌具有抑菌活性的物质。初步研究了枯草芽孢杆菌HNDF2在混菌发酵中对BL-21产抗菌物质的影响。初步分析了某些放线菌分别与BL-21和HNDF2混合发酵的效果,为微生物混合发酵的研究奠定实验基础。混菌发酵与单菌发酵代谢产物的抗菌结果表明,混菌发酵代谢产物对尖孢镰刀菌的抑菌圈直径为21.22±0.57 mm,BL-21单菌发酵代谢产物的抑菌圈直径为17.89±0.68mm,HNDF2单菌发酵代谢产物的抑菌圈直径为9.11±0.26mm。经过显著性分析,混菌发酵的抑菌活性显著高于两菌单独发酵。混菌发酵代谢产物经CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析共出现4个洗脱峰,其中洗脱峰3经SDS-PAGE电泳检测出一条大约为12kDa的条带,经Sephadex G75凝胶过滤层析后,出现11个洗脱峰,其中洗脱峰2具有抑菌活性,经过HPLC-MS质谱分析,得到两种成分,质荷比分别为508.0和530.9。而BL-21单菌发酵代谢产物经CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析共出现2个洗脱峰,经SDS-PAGE电泳检测,洗脱峰1中出现一条大约为14kDa的条带,洗脱峰2中出现一条大约为12kDa的条带。经过单菌发酵和混菌发酵代谢产物的对比分析,它们出峰时间不同,洗脱峰数量不同,分离得到的代谢产物也不完全相同。通过测定HNDF2不同培养时间、不同菌体数量、不同代谢产物浓度对混菌发酵的影响,得出结论,即培养48h的HNDF2种子液与BL-21混名合发酵后的抑菌效果最好,达到了 24±0.55mm。当HNDF2的菌体浓度在9.84×107CFU/mL时,与BL-21.混合发酵后的抑菌圈直径最大,为19.56±0.33mm。在混菌发酵中,加入HNDF2全种子液可以刺激BL-21产生更多的抗菌物质。放线菌分别与BL-21和HNDF2混菌发酵的结果表明,菌株HD087、HD103、HD006与BL-21混合发酵后的抑菌活性均高于BL-21单菌发酵,当四株放线菌分别与HNDF2混合发酵时,只有HD087与HNDF2的混菌发酵液的抑菌活性明显高于HNDF2单菌发酵。