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固相多肽合成技术是现代蛋白质化学研究的一项关键技术，对现代分子生物学和基因工程研究具有重大影响和意义。本文首先简单介绍了固相多肽合成的基本原理、研究现状、存在的主要问题及解决措施以及多肽合成中使用的检测方法。通过对Fmoc定量检测方法、水杨醛检测方法以及红外光谱法进行研究和比较，确定Fmoc方法作为C端氨基酸与树脂连接效率的定量检测方法。胸腺素α1（thymosinα1）是Goldstein等1977年首次在小牛胸腺组织提取物胸腺素第五组分（TF5）中分离出来的一种多肽，含28个氨基酸，分子量3108，等电点4.2，其N端Ser乙酰化，氨基酸序列：Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn胸腺素α1主要作为一种免疫增强药物，主要用于乙型肝炎的治疗，具有广阔的国内外市场。通过比较国内外在胸腺素α1的各种合成方法，结合本实验室的条件，采用以HMP树脂为合成载体，Fmoc-氨基酸为原料，在PE公司的ABI433A型多肽合成仪上来合成胸腺素α1。实验主要分为四个部分：1． 保护胸腺素α1-HMP树脂复合物的合成采用ABI433A型多肽合成仪的FastMoc1.0mmol化学合成策略，在20℃下反应合成胸腺素α1,结果表明，根据树脂增重计算，最终合成效率为81.9%。2． 保护胸腺素α1-HMP树脂复合物的切割通过对多种不同切割试剂进行比较，选择最佳切割条件：95% TFA/2.5%TES/2.5%H2O（V/V/V）为切割试剂，室温下反应1.5h。3． 胸腺素α1的分离纯化在AKTA Explore100型蛋白纯化系统上进行纯化，采用了大连依利特反相C18柱，紫外220nm检测，通过比较，确定采用下面缓冲：A，25mmol 醋酸钠缓冲，pH 7.1；B，乙腈，在该洗脱条件下，最终产品纯度最高达95.53%。4. 胸腺素α1的性质鉴定HPLC分析结果表明纯化后的胸腺素α1纯度为95.53%。质谱分析图给出了胸腺素α<WP=4>1的三电荷峰1037.8、双电荷峰1555.0。氨基酸分析结果也和理论上一致。证明合成的就是胸腺素α1。