多价大肠杆菌噬菌体裂解性能分析及基因组注释

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xianglongke2000
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多价噬菌体具有广泛的宿主谱,在细菌病的治疗方面有着广阔的应用前景。本研究以一株禽源致病性大肠杆菌的多价噬菌体Bp7为主要研究对象,进行了噬菌体形态、裂解谱、生活周期、基因组学及其与其它噬菌体的抗原差异性分析的一系列研究。   以40株大肠杆菌为宿主菌,采用双层琼脂平板法测定噬菌体Bp7的效价及裂解谱,并应用透射电镜观察分析其病毒粒子形态以及其侵染并裂解大肠杆菌的过程。结果显示:Bp7宽噬率为35%。病毒粒子的头部外廓呈六边形,平均直径约73nm,尾长约106nm,有尾鞘;噬菌体Bp7侵染大肠杆菌后30min时处于隐蔽期,45min时处于成熟阶段,60min时已经进入释放期,一个溶菌周期大约为60min。   选择6株不同裂解谱的大肠杆菌噬菌体,进行抗体与噬菌体的交叉抑制试验,并经SDS-PAGE电泳分析噬菌体间的抗原差异。结果:原裂解谱相同的噬菌体,主蛋白区域分布相同;原裂解谱部分相同的噬菌体,蛋白条带分布情况相似。具有相同或部分相同裂解谱的噬菌体,在吸附同一株大肠杆菌时所结合的位点并不一定相同;在这6株噬菌体的表面存在着部分相同的表面抗原,同时存在着各自特异的表面抗原。   采用鸟枪法对噬菌体Bp7基因组进行序列测定,并进行注释。结果:噬菌体Bp7与肠杆菌科噬菌体JS98和JS10同源性达90%以上;已发现243个ORFs,预测到68个可能基因,包括头部、颈部、衣领、尾鞘、尾管、基底板、尾丝基因、DNA聚合酶、翻译抑制蛋白、DNA结合蛋白、重组蛋白、引发酶/解旋酶、末端酶和假设蛋白等基因。
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