根癌农杆菌介导的水稻转基因体系研究

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水稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要粮食作物之一,我国40%左右的粮食依赖于水稻生产,由于其基因组相对较小,且已经完成全基因组测序,目前已成为作物基因组研究的模式作物。农杆菌介导法由于具有操作简便、转化效率高、较少的插入拷贝数以及整合机制相对简单等优点,是目前普遍应用的水稻转基因方法。但由于水稻品种间的遗传差异对植株再生和转化效率有较大的影响,因此如何建立一种高效、稳定、实用的愈伤组织再生体系和农杆菌转化体系仍有许多问题需要研究。本研究以粳稻(Oryza sativa L. ssp.japonica)品种日本晴、中花11、苏御糯、爱知旭等品种为材料,进行成熟胚和幼胚的愈伤组织诱导培养,并利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化法将实验室克隆的0sCBL5、0sCBL6、0sNHX2、ZFP177、ZFP181、0sSNAP32、OsNPSN11、0sSYP71等21个基因对两种来源的愈伤组织进行转化,建立了高效农杆菌介导的水稻转基因体系。研究结果表明,粳稻幼胚的胚性愈伤组织诱导率相对高于成熟胚,江苏地方品种苏御糯的成熟胚和幼胚的愈伤组织诱导率都很高,分别为95.2%,96.2%,胚性率也在95%左右。用农杆菌转化法将不同目标基因转化苏御糯幼胚愈伤组织,抗性愈伤转化率和抗性植株转化率分别为70.5%、52.4%,明显高于中花11和日本晴两个水稻品种的转化率。对其可能的作用机理进行了讨论。
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