OCT4假基因5通过与miR-145竞争性结合上调OCT4表达促进子宫内膜癌增殖

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子宫内膜癌(EC)是原发于子宫内膜的上皮性恶性肿瘤,是女性生殖器三大恶性肿瘤之一。近年来 EC的发病率在国内外有逐年上升并年轻化的趋势,甚至已经超过宫颈癌的发病率,对全球妇女的健康产生严重的威胁。子宫内膜癌的主要症状是不规则阴道流血,根据组织学特征被分为I型和II型子宫内膜癌。由于每个患者可能具有不同的遗传背景和发病机制,研究内膜癌分子表达差异有益于对不同患者采取个性化治疗。目前早期患者主要行手术治疗,晚期和复发癌则以化疗为主,放疗和孕激素治疗为辅,但其治愈率低,愈后效果差。因此,子宫内膜癌的早期发现及治疗至关重要,探究新的灵敏特异能用于早期诊断子宫内膜癌的分子标记物及有效治疗靶点已经成为改善子宫内膜癌预后的首要科研任务。  OCT4在维持干细胞多能性和增殖方面起着关键作用,并在多种人类肿瘤中高表达。目前已知OCT4与多种肿瘤的发生、发展及转移密切相关,这表明OCT4对癌变起着关键作用。已有一些研究证据表明OCT4的异常表达在子宫内膜癌中发挥了重要作用,但OCT4在子宫内膜癌发生过程中的具体作用机制仍未阐明。OCT4有8种假基因,有关OCT4假基因与肿瘤的研究是目前的热点,但在子宫内膜癌中尚未见相关报道。本研究的目的是筛选出子宫内膜癌中表达量最高的OCT4假基因并探索其对子宫内膜癌细胞增殖能力的影响。  基于此,我们首先通过克隆加测序实验来筛选子宫内膜癌中表达量最高的OCT4假基因;应用realtime-PCR方法在14例良性子宫内膜组织和29例子宫内膜癌组织以及5种子宫内膜癌细胞株中检测了OCT4-PG5 RNA的表达情况;通过转染miR-145模拟物和抑制剂来研究其对OCT4-PG5和OCT4表达的调控作用;选用细胞增殖和克隆形成实验来了解 OCT4-PG5和 OCT4对细胞增殖的影响;利用siRNA敲减 OCT4以明确 OCT4-PG5对细胞生长的影响是否依赖于OCT4。  我们发现OCT4-PG5是子宫内膜癌中表达量最高的OCT4假基因,OCT4-PG5在子宫内膜癌中异常高表达,且 OCT4-PG5的过度表达增强了细胞中OCT4-PI3K/ AKT-cyclinD1信号通路从而促进细胞增殖。此外,miR-145模拟物下调OCT4的表达,而过表达OCT4-PG5可以激活OCT4-PI3K/AKT-cyclinD1信号通路并恢复OCT4的表达。总之,这些数据表明,OCT4-PG5可以作为“miRNA海绵”吸附miR-145,减少其对OCT4转录本的抑制作用。本研究为阐明子宫内膜癌中OCT4表达的调控机制提供了新的见解。
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