猪源致泻性大肠埃希菌的分离鉴定及消毒剂杀菌效果评价研究

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致泻性大肠埃希菌(DEC)是重要的食源性致病菌,对人和动物均有致病性,容易引起儿童和幼畜的严重腹泻。DEC种类较多,广泛存在于动物肠道中,可通过养殖、屠宰等环节发生传播和污染,威胁食品安全和人类健康。但国内外关于猪肉生产链中DEC的监测数据缺乏,严重制约了DEC风险评估的实施和管理措施的制定。为此,本研究于2021年从湖北省和广东省生猪屠宰场采集不同类型样品,进行DEC的分离鉴定和耐药性检测,探讨DEC在生猪屠宰环节的污染传播规律;进而对DEC分离株进行了消毒剂敏感性试验及消毒剂定量杀菌试验,探讨生猪屠宰环节DEC的有效消毒防控措施。取得的主要结果如下:1.猪源致泻性大肠埃希菌的分离鉴定结果2021年共采集直肠拭子、体表拭子、肉样等不同类型样品1315份,分离得到DEC 23株(1.75%),包括肠致病性大肠埃希菌(EPEC)22株(1.67%)及肠出血性大肠埃希菌/产志贺毒素大肠埃希菌(EHEC/STEC)1株(0.08%)。其中湖北C屠宰场18株(含1株STEC)(6.43%)、广东D屠宰场4株(1.21%)及湖北A屠宰场1株(0.43%),均分离自生猪直肠拭子,而体表拭子、肉样及环境样品中均未检出,提示DEC主要来自养殖场猪体,优势致病型为EPEC,规范操作时不易通过屠宰链造成猪肉污染。2.猪源致泻性大肠埃希菌分离株的抗菌药物敏感性采用微量肉汤稀释法检测9种常用抗菌药物对23株DEC的最小抑菌浓度(MIC)。结果显示:对氨苄西林、氟苯尼考耐药的菌株较多,分别为22株(95.65%)和19株(82.61%);其次为氨曲南(30.44%)、头孢噻肟(26.09%)、庆大霉素(21.74%);分离株对替加环素、多黏菌素E、恩诺沙星及美罗培南均表现为敏感。3.猪源致泻性大肠埃希菌对常用消毒剂的敏感性采用微量肉汤稀释法检测8种常用消毒剂对23株DEC的最小杀菌浓度(MBC)。结果显示:三氯异氰脲酸钠对分离株的MBC为7273 mg/L,聚维酮碘MBC分布范围为2008~4014 mg/L,过硫酸氢钾MBC分布范围为1004~2007 mg/L,氢氧化钠MBC分布范围为1966~3932 mg/L,次氯酸钠溶液MBC为1065 mg/L,戊二醛水溶液MBC分布范围为2560~5120 mg/L,苯扎溴铵MBC分布范围为8~64 mg/L,癸甲溴铵MBC分布范围为0.35~2.8 mg/L。MBC值均未超过农业行业标准推荐的消毒浓度范围,表明8种常用消毒剂均可有效杀灭分离株。本研究暂未发现细菌耐药性与消毒剂敏感性之间的相关性。4.不同百毒杀产品对猪源致泻性大肠埃希菌的杀灭效果比较采用悬液定量杀菌试验评价6种品牌百毒杀产品对分离株的杀菌效果,结果显示:不同品牌百毒杀产品的杀菌效果存在显著差异,其中S3、S4的杀菌效果要优于其他4种品牌;当浓度为1:1000、作用时间为15 min时,S3、S4均表现出较好的杀菌效果;S4易受温度影响,10℃时杀菌效果较好。5.百毒杀在不同材质表面的杀菌效果比较载体浸泡定量杀菌试验结果显示:在不同材质的载体表面,百毒杀的杀菌效果有显著差异,对附着于橡胶、塑料及不锈钢表面的分离株杀灭效果较好,而对附着于棉布的分离株杀灭效果不佳,需要提高杀菌浓度或延长作用时间。
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