乌斯他丁和环磷酰胺对乳腺癌CXCR4表达及增殖的影响

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第一部分乌斯他丁对环磷酰胺诱导乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231趋化因子受体CXCR4的表达及增殖的影响目的:观察乌斯他丁(UTI)对环磷酰胺(CTX)诱导体外培养的雌激素受体阳性(ER~+)乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性(ER~-)乳腺癌细胞MDA-MB-231中趋化因子受体CXCR4的表达及增殖的影响;同时观察趋化因子受体CXCR4与乳腺癌转移的关系。方法:体外培养的乳腺癌细胞MCF-7/MDA-MB-231随机分为八组:空白对照组,乌斯他丁高、中、低剂组,环磷酰胺组,乌斯他丁高、中、低剂组+环磷酰胺组,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测UTI对CTX诱导的两种乳腺癌细胞CXCR4表达的影响;采用细胞计数法及噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力;利用趋化板(Transwell板)检测基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对乳腺癌细胞MCF-7的趋化作用。结果:UTI抑制MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖,与对照组细胞相比,细胞数目明显减低;MTT分析示细胞增殖下降,通过与CTX组比较,其抑制作用不如CTX,但CTX与UTI联合,其作用优于CTX,且UTI联合CTX组的细胞增殖能力明显减弱。结论:UTI能增强CTX诱导的乳腺癌细胞MCF-7/MDA-MB-231增殖抑制作用,且两者具有协同效应。其机制可能与降低CXCR4基因的表达有关。第二部分乌斯他丁对环磷酰胺诱导乳腺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及对CXCR4表达的影响目的:观察乌斯他丁(UTI)及环磷酰胺(CTX)在动物模型上抗肿瘤的作用。同时在乳腺癌的动物模型上再次观察观察乌斯他丁(UTI)对环磷酰胺(CTX)诱导乳腺癌组织中CXCR4的表达及增殖的影响。方法:选用nu/nu裸鼠40只,接种MCF-7乳腺癌细胞,构建乳腺癌动物模型,之后随机分为八组:生理盐水对照组,乌斯他丁高、中和低剂组,环磷酰胺组,乌斯他丁高、中、低剂组+环磷酰胺组,各5只,接种后第6天,开始腹腔给药;接种14天后处死所有小鼠,统计皮下平均瘤重;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测UTI及CTX对乳腺癌组织CXCR4表达的影响;免疫组化进一步对上述结果验证。结果:UTI抑制皮下瘤生长的作用不如CTX,但CTX与UTI联合作用,则其抑制作用要优于CTX;皮下瘤重依次为(6.95±2.56、4.19±1.34、4.92±1.08、5.36±1.19、3.86±1.73、0.87±0.50、1.93±0.96和2.25±1.45);RT-PCR结果显示UTI下调CXCR4表达水平的作用不如CTX,但CTX与UTI联合作用,则其抑制作用要优于CTX。结论:UTI抑制乳腺癌的作用不如CTX,但CTX与UTI联合作用,则其抑制作用要优于CTX。
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