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农产品安全问题历来受到各个国家和地区的重视,真菌毒素的污染在其中占了很大的比例。目前有多种方法对真菌毒素进行检测,但是存在如操作复杂、试剂用量大、检测时间长、检测成本高等不足。本文利用近年来新型的纳米材料——光子晶体作为载体,基于化学发光及免疫分析技术,建立一种高通量、低成本,能够同时检测多种真菌毒素的检测方法。采用改进Stober法制作的不同粒径的单分散纳米二氧化硅微球,将其组装为光子晶体微球,通过煅烧来增加其机械强度和亲水性。利用光纤光谱仪、扫描电子显微镜对制作的微球进行表征。对微球表面进行化学修饰,增强与生物大分子的结合能力。组装的光子晶体微球表面积大,可有效增加生物分子的结合数量,从而提高检测灵敏度。本文将其应用于农产品中的黄曲霉毒素B1的单重检测中,通过对反应条件的优化,最终确定采用pH=9:6的碳酸盐缓冲液作为包被缓冲液,包被抗原AFB1-BSA浓度为1200ng/mL,黄曲霉毒素B1单克隆抗体稀释度为1:10000,辣根过氧化物酶标记的二抗(HRP-IgG)稀释度为1:6000。利用优化的条件,制作出黄曲霉毒素B1检测标准曲线,曲线线性范围为1-0.0001ng/mL,线性方程为y=2663.676-4176.177x,R2=0.99546。之后对黄曲霉毒素B1单克隆抗体的特异性进行研究,结果显示特异性强,与黄曲霉毒素B1类似物并无明显交叉反应。最后对三种不同农产品中添加不同浓度的黄曲霉毒素B1,进行回收率测定,其回收率分别为:大米82.86±3.66%-112.82±3.33%、玉米78.69±6.72%-116.52±10.23%、小麦75.88±15.86%-122.92-10.49%。利用光子晶体微球的自身光学特性,利用光纤光谱仪测量微球反射峰位置,从而进行光学编码。将微球分别包被三种抗原(AFB1-BSA、FB1-BSA、OA-BSA),对农产品中的真菌毒素进行多重检测,对反应的部分条件进行优化,参照单重检测的反应条件,最终建立了三种毒素(AFB1、FB1、OTA)的检测标准曲线,AFB1、FB1、OTA三种毒素的线性范围分别为:1-0.001ng/mL、1-0.001 ng/mL、1-0.01 ng/mL。线性方程分别为:y=3998.538-3509.456x(R2=0.98667)、y=2184.189-3493.776x (R2=0.99666)、y=1807.432-1521.816x(R2=0.99981)。最后对大米中添加不同浓度的AFB1、FB1、OTA,进行回收率测定,其回收率分别为:AFB1 88.41±9.00%-124.66 ±8.54%、FB1 72.07±7.12%-123.78±7.97%、OTA 77.77±3.25%-114.36±13.17%。