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目的1.探讨细胞学标本在肺癌分子细胞病理学的应用。2.探讨细针吸取细胞学(Fine Needle Aspiration Cytology,FNAC)标本传统涂片和液基薄层涂片应用免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)检测进展期肺腺癌间变淋巴瘤激酶(anaplasitic lymphoma kinase,ALK)蛋白表达的可行性。方法1.收集应用细胞学涂片标本进行ALK基因检测的肺癌病例338例,查阅其基本信息、病理形态学结果,基因检测信息(表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、K-RAS 原癌基因(K-RAS oncogene,K-RAS)、棘皮动物微管样蛋白 4-间变淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like 4-anaplasitic lymphoma kinase,EML4-ALK)、Ros 原癌基因 1(ros oncogene 1,Ros-1)、c-间质表皮转化因子(c-mesenchymal-epidermal transition,c-Met)、美国癌症联合委员会(American Joint Committee on Cancer,AJCC)临床分期,治疗情况(手术、放射治疗,化学治疗,靶向治疗)等进行总结。2.收集肺腺癌淋巴结转移灶FNAC标本147例,包括传统涂片47例及液基薄片100例,进行VentanaALK(D5F3)ICC检测,并与逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)或荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)结果进行对照。结果1.338例行ALK融合基因检测病例,阳性率为9.17%(31/338),EGFR、K-RAS突变率分别为 47.74%(159/333)、7.50%(25/333),Ros-1 基因融合率为 4.00%(3/75),c-Met基因扩增率为4.11%(3/73);276例(81.66%)在首次就诊时已处于ⅢB-Ⅳ期;338例肺癌ALK检测标本中,包括浆膜腔积液中ALK阳性率为5.52%(9/163);穿刺细胞学标本中ALK阳性率12.57%(22/175)。217例(64.20%)发生基因改变的病例中,共有123例进行了靶向治疗:靶向药物一线、二线治疗的病例分别为76例、47例。另有10例选择试吃或盲吃靶向药物。2.ALK蛋白在肺腺癌淋巴结转移灶FNAC标本阳性表达率为11.56%(17/147),传统涂片及液基薄片ALK阳性表达率分别为10.64%(5/47),12.00%(12/100)。147例标本中有57例从分子水平进行验证,包括阳性病例17例及阴性病例40例,总符合率为96.49%(55/57)。肺腺癌淋巴结转移灶FNAC标本检测ALK蛋白敏感性为94.12%(16/17),特异性为97.50%(39/40)。传统涂片ALK蛋白检测的敏感性和特异性均为100%(敏感性5/5,特异性10/10),液基薄片ALK蛋白检测敏感性、特异性分别为 91.67%(11/12)、96.67%(29/30)。结论1.对于初次就诊就处于晚期(ⅢB-Ⅳ)肺癌患者或早期肺癌术后进展患者,细胞学标本是进行靶向治疗相关驱动基因检测的可靠标本来源。2.胸腔积液和淋巴结细针穿刺是常见的细胞学标本,比较于浆膜腔积液,ALK融合基因在淋巴结穿刺细胞学标本中更容易检测到,二者差异有统计学意义。3.细胞学标本能够提供足够细胞量完成临床靶向治疗相关基因检测。4.对于无法制成细胞块的细胞学标本,细针穿刺传统涂片及液基薄片均可用来进行 ALK(D5F3)ICC 检测。5.对于ALK-ICC检测在液基薄片的应用,由于液基细胞保存液成分可能会导致ALK蛋白表面抗原丢失,导致异质性表达,建议可疑阳性病例进行FISH检测验证。