第一部分肺血管内皮细胞S1PR1在流感病毒诱导的急性肺损伤中的作用背景:高致病性流感病毒是威胁人类健康的一种重要病原体,感染早期会引起过度的免疫应答,产生“细胞因子风暴”,诱导急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）的发生,进一步导致死亡。已有研究报道肺内皮细胞是流感病毒感染诱发炎症风暴的枢纽环节,激动1-磷酸鞘氨醇受体1（Sphingosine 1-phosphate Receptor1,S1PR1）可显著降低炎症免疫反应。本研究期望通过明确肺血管内皮细胞S1PR1在流感所致炎症反应中的地位,探究S1PR1调控肺血管内皮细胞促炎因子产生的可能机制,为临床治疗流感所致ALI提供新思路。方法:构建诱导型血管内皮细胞S1PR1基因敲除小鼠,利用S1PR1敲除小鼠,予以甲型H1N1流感病毒感染,观察小鼠的存活时间,计算肺组织湿干比,评估肺组织病理损伤程度,检测肺泡灌洗液中炎症因子水平。给予S1PR1特异性受体激动剂CYM-5442处理,探究激动S1PR1对流感病毒诱导的ALI的治疗效果,分析S1PR1介导的相关信号通路及可能的机制,并进一步评估S1PR1激动剂CYM-5442与抗病毒药物奥司他韦联合用药的疗效。结果:感染致死剂量的甲型H1N1流感病毒后,与对照鼠相比,血管内皮细胞S1PR1基因敲除小鼠死亡率明显增高,肺水肿程度及肺病理损伤程度显著加重,炎症因子水平显著增加。S1PR1的缺失和S1PR1的激活不影响流感病毒在小鼠肺组织中的复制。给予CYM-5442可以有效地缓解H1N1流感病毒感染造成的肺损伤。在小鼠感染H1N1流感病毒后,体内ERK/JNK/MAPK和NF-k B信号通路被激活,介导ALI的发生和发展,当给予CYM-5442治疗后,ERK、JNK、p65磷酸化的水平被削弱。治疗流感病毒感染时,CYM-5442与奥司他韦联合用药的疗效比CYM-5442单药或奥司他韦单药的疗效更优。结论:血管内皮细胞S1PR1在甲型H1N1流感病毒感染诱导的小鼠ALI中发挥了重要作用,通过干预肺血管内皮细胞S1PR1可以调控机体炎症反应,S1PR1特异性受体激动剂和抗病毒药物联合应用为临床上治疗流感病毒大爆发提供了潜在的治疗策略。第二部分急性呼吸窘迫综合征患者血清S1P水平和S1P基因多态性的相关研究背景:1-磷酸鞘氨醇（Sphingosine 1-phosphate,S1P）是细胞膜磷脂代谢的产物,作为“第二信使”调节多种生物学功能,通过其内皮屏障调节功能和免疫调节功能,参与调节急性呼吸窘迫综合征（Acute respiratory distress syndrome,ARDS）的多个病理生理过程。我们推测血清S1P水平可能与ARDS患者的预后有关,以及S1P基因多态性可能与ARDS的发生有关。方法:我们采用多中心前瞻性研究方法,收集ARDS患者和健康人群的资料和血液标本,研究周期为2018年01月至2019年08月。采集ARDS患者入院后24h内及第7天的血液标本,同时收集相关的临床资料数据。测定ARDS患者血清中S1P水平,分析血清S1P水平及其动态变化与疾病严重程度和转归之间的关系。同时提取外周血DNA样本,进行S1P基因单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）检测,分析S1P基因多态性与ARDS的发生及血清S1P水平之间有无关联。结果:本研究共纳入了121位ARDS患者和100位健康人。ARDS患者血清S1P水平明显低于健康对照人群。相关性分析结果显示,S1P水平与肺外器官功能衰竭数目呈负相关,与急性生理与慢性健康评分II（Acute physiology and chronic health evaluation II,APACHE II）也呈负相关。血清S1P水平越低,患者器官功能衰竭数目越多,APACHE II评分越高。血清S1P水平变化与ARDS患者临床结局相关。S1P基因rs3743631多态位点在隐性模型下与ARDS的发生风险密切相关,相比AA、AG基因型,GG基因型是ARDS发生的易感基因型;rs907045多态位点在显性模型下与ARDS发生风险密切相关,相比TT基因型,AA、TA基因型增加ARDS发生的风险。在ARDS患者中,多态性位点rs3743631GG基因型患者血清S1P水平比AG、GG基因型更低,多态性位点rs907045 AA、TA基因型患者S1P水平比TT基因型更低,差异均有统计学意义。结论:ARDS患者血清S1P水平较健康人群明显降低。ARDS患者血清S1P水平越低提示预后不良。S1P基因的rs3743631和rs907045多态位点与ARDS的发生存在关联。