论文部分内容阅读
目的以抗肿瘤药物VLB作为模型药物制备VLB脂质体（VLB-L）并进行处方优化研究。将亚甲蓝和VLB-L物理混合作用于鼻咽癌耐药细胞，进行初步的细胞毒性研究。方法采用pH梯度法制备VLB-L。通过紫外可见分光光度法（Ultraviolet-visible spectrometry,UV）测定药物包封率。将VLB-L分别在4℃和25℃下密闭放置30d，以包封率为指标考察VLB-L稳定性。将MB溶液和VLB-L物理混合，以鼻咽癌细胞KB及其耐药细胞KBV200为细胞模型，分别在590nm波长的激光照射和避光条件处理，进行MTT实验，考察MB和VLB-L共同作用下逆转鼻咽癌MDR效果。结果通过正交试验筛选出制备VLB-L的最佳处方：药脂比1：10，磷脂（PC）与胆固醇（Ch）的比例是4：1，外水相pH值为7.4，孵育温度为50℃，孵育时间为15min。在最佳处方条件下，包封率可以达到92.26%，用动态光散射法测定VLB-L粒径分布均匀，平均粒径为169.2nm,zeta电位为-9.28mV。MTT检测结果显示：经光照射，VLB-L＋MB对耐药细胞KBV200增殖抑制率最高且有浓度依赖性。结论本课题采用UV法测定VLB-L包封率，采用Sephadex G-50凝胶柱分离脂质体，方法准确，重现性良好，而且简便快捷。稳定性实验表明，在4℃贮存时，VLB-L比较稳定。VLB-L体外释药实验结果表明，药物经脂质体包载后，具有较好的缓释效果。VLB-L＋MB经590nm激光照射后，对耐药细胞株KBV200增殖抑制率最高，达到85.48%，提示MB经光照射后可能有效的逆转肿瘤多药耐药。