【摘 要】
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目的:将PDGF联合纤维蛋白凝胶注入兔胫骨骨折不愈合模型局部,通过Micro-CT、HE染色、血清生化指标及生物力学测试等方法,从影像学及组织形态学等方面观察研究PDGF对骨折不愈合修复的影响,为骨折患者后期发生不愈合和延迟愈合的治疗提供新的依据和选择。方法:挑取体重2.0-2.5kg的雄性健康新西兰大白兔48只,遵循无菌原则,人为造成兔右侧胫骨中段骨折,后利用电烧灼法破坏骨折周围骨膜组织,研磨骨
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目的:将PDGF联合纤维蛋白凝胶注入兔胫骨骨折不愈合模型局部,通过Micro-CT、HE染色、血清生化指标及生物力学测试等方法,从影像学及组织形态学等方面观察研究PDGF对骨折不愈合修复的影响,为骨折患者后期发生不愈合和延迟愈合的治疗提供新的依据和选择。方法:挑取体重2.0-2.5kg的雄性健康新西兰大白兔48只,遵循无菌原则,人为造成兔右侧胫骨中段骨折,后利用电烧灼法破坏骨折周围骨膜组织,研磨骨折端骨质使其造成一定范围缺损,后以2.5mm克氏针行内固定,骨折端骨膜破坏的同时造成了骨折端血运受损,术中内固定所用克氏针直径略小于胫骨髓腔直径,人为造成骨折端内固定轴向不稳定,术后6个月,观察大白兔胫骨骨折未愈合,表明建模成功。建模成功,随机数字表法,分A组（空白对照组）、B组（纤维蛋白凝胶组）、C组（PDGF组）、D组（PDGF+纤维蛋白凝胶组）4个组,每组12只,各组分别在建模成功后在骨折局部经皮注射药物,连续7天,1天1次,各组注射的药物分别为:B组（200u L纤维蛋白凝胶）、C组（200ug PDGF+1m L生理盐水）、D组（200u L纤维蛋白凝胶+200ug PDGF+1m L生理盐水）,A组按同等计量盐水注射并采取余三组相同的给药时间和次数。注射药物8w后实验大白兔取血留标并处死,行Micro CT观察各组骨折端愈合情况以及检测各组骨折端骨矿含量、骨矿密度及骨体积分数,Micro CT检查完毕后取各组骨折周围骨痂组织标本,对其脱钙HE染色行组织学观察。利用蛋白质芯片法测定各组4周、8周兔血清中VEGF和IGF-1的含量。用统计软件SPSS25.0,统计分析所得数据,计量资料均数±标准差（?X±S）表示,采用完全随机设计单因素方差分析法对各组数据进行分析处理、LSD法对组间数据进行两两比较,分析前对各组数据进行方差齐性检验及正态检验,检验水准a=0.05,P＜0.05则为有统计学意义。结果:Micro CT结果Micro CT分析8周后骨折部位骨组织形态和骨量变化。结果显示D组不论是骨矿含量、骨矿密度还是骨体积分数均明显高于余下三组,C组优于A、B组低于D组,A、B两组间无明显差异。组织学观察结果Micro CT分析结束,各组分别取各自骨痂标本,分别经固定、脱钙、脱水处理后,染色行组织学分析,结果显示:D组联合组的骨小梁明显增多,大部分能够交织成网状,纤维骨痂减少,骨性骨痂增多,可见成熟的板层状骨;C组可见部分骨小梁形成,未形成网状,标本中能够见少量成熟板层骨及骨性骨痂出现;骨性骨痂在A组对照组和B组纤维蛋白凝胶组中增多不明显,组织中充斥大量纤维骨痂和不成熟骨小梁形成。血清生化指标结果测定血清中VEGF、IGF-1含量（蛋白质芯片法）显示,注射4周时,C组PDGF组和D组PDGF联合纤维蛋白凝胶组血清中VEGF、IGF-1含量明显高且对比A、B组且差异显著（P＜0.05）,PDGF组和联合组组差别不明显,P＞0.05;注射8周后,联合组所测血清中含量优于余A、B、C三组,C组明显高于A、B组,但低于联合组（D组）,P＜0.05;对照组和凝胶组差异不明显,P＞0.05。生物力学测试结果解剖骨折部位,分离组织后用商业材料分析系统（Instron3343材料试验机）,行三点弯曲试验,记录其加压中的胫骨极限载荷,分析计算骨折区域的力学性质。用统计学分析计算后显示,A、B组没有明显区别,C组较A、B组增加明显,PDGF联合纤维蛋白凝胶治疗的D组增加最为突出,说明了PDGF联合纤维蛋白凝胶更能有效且长时间促进骨折区骨形成。结论:1、单独应用外源性血小板衍生生长因子（PDGF）能够明显改善兔胫骨骨折不愈合。2、纤维蛋白凝胶本身无促成骨作用,与PDGF联合应用能够大大发挥后者作用,且与单独应用血小板衍生生长因子相比作用时间更长,后期效果更明显。
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