【摘 要】
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本文利用CMC透明圈分离法从土样中分离获得1株产碱性纤维素酶的假诺卡氏菌属(Prauseria)放线菌IS-H,采用液体振荡培养技术,以6%接种量接种子液于pH 8的发酵产酶培养基中,28℃振
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本文利用CMC透明圈分离法从土样中分离获得1株产碱性纤维素酶的假诺卡氏菌属(Prauseria)放线菌IS-H,采用液体振荡培养技术,以6%接种量接种子液于pH 8的发酵产酶培养基中,28℃振荡培养5d,CMC酶活力达到7.64U/mL。通过对CMC液化力、糖化力及滤纸糖化力测定分析,此菌株产生的酶大部分属内切-β-1,4-葡聚糖苷酶(CMC酶),对该酶特性进行初步研究,酶的最适反应温度为40℃,当pH维持于6~11,温度维持于10~60℃,酶活力可保持在60%以上,能较好地满足日常洗涤的环境要求。利用紫外线(UV)对菌株IS-H进行诱变,获得1株CMC酶活力达到17.59U/mL的突变株MS-H16。当以6%接种量接种子液于pH8,分别以20g/L蔗糖、10g/L硝酸铵为碳、氮源,添加0.5g/LMgSO4的最适产酶培养基中,26℃振荡培养5d,其酶活力达到18.29U/mL,比初始酶活力提高了6.29倍。 同时以一株产CMC酶的软化芽孢杆菌(B. macerans)IS-B为研究对象,在摇瓶振荡培养条件下,以5%接种量接24h种子液于pH9,分别以4.0%麦芽糖和1.0%蛋白胨为碳、氮源,添加0.5%NaCl和0.1%KH2PO4,装液量为75mL/250mL的最适产酶培养基中,37℃振荡培养48h,酶活力达到85.69U/mL;在5L发酵罐中,以5%接种量接24h种子液于pH10的最适产酶培养基中,37℃发酵48h,当搅拌速度为400r/min,通气量为1.0L/min,溶氧值可维持在65%以上,酶活力提高到130.10U/mL,达到国内较高水平。对IS-B产生的CMC酶酶学性质进行初步研究,酶反应温度以50℃为宜,当pH维持于7~10,温度维持于30~70℃时,酶活力可保持在60%以上,具有较好的酶活稳定性。
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