本文在总结前人研究的基础上，通过在获能液中添加不同浓度的葡萄糖、孕酮及钙离子载体，应用体外培养技术对牛精子体外获能作了进一步研究，通过对顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率的观察，筛选出获能液中最适葡萄糖和孕酮浓度，确定出最佳的钙离子载体浓度和作用时间组合；旨在建立健全一套完整的体外获能技术体系，为胚胎工程和生产实践提供技术操作规程和方法，为理论研究积累资料，研究结果如下： 1.葡萄糖是精子获能和维持超激活运动的主要能源物质，其代谢过程中产生的活性氧在牛精子体外获能、受精过程中起重要作用，高浓度(超过9.15mM)葡萄糖有利于获能的完成；但是对早期胚胎发育不利，对早期胚胎发育来说其最适添加量为6.10mM，此时的囊胚率最高。 2.孕酮是重要的生殖激素，在生殖过程中起重要作用，本试验表明单独添加孕酮不能诱导牛精子体外获能；孕酮只能诱导获能精子发生顶体反应，而且有一个剂量依赖关系，在本试验中以1μg/ml的添加效果最好。 3.孕酮的添加对精子活率有一定的影响，当孕酮浓度超过1μg/ml、作用时间超过4h时，精子活率下降；本试验还表明获能液中添加孕酮，无论剂量多少，对胚胎体外发育无明显的促进作用。 4.钙离子载体是诱导牛精子获能的重要物质之一，存在一个处理浓度-时间阈值，本试验的结果表明最佳处理浓度和时间组合是0.1μM处理2min或者0.15μM处理0.5min，此时的囊胚率最高。 5.Ca2+在牛精子体外获能过程中起重要作用，钙离子载体诱导牛精子获能是通过Ca2+的流动来实现的，当获能液中无Ca2+存在时，钙离子载体的添加不能诱导牛精子获能的发生。