本文系统的研究了用单精注射法生产转基因家兔胚胎过程中，不同处理的精子对外源基因的结合能力，影响精子结合外源DNA的因素以及促进精子结合外源基因的方法。以GFP基因作为转基因家兔胚胎的报告基因，生产转基因家兔胚胎。 经过洗涤的兔精子具有明显吸附6-甲基诺丹明-6-dUTP标记的DNA的能力，而且洗涤的程度越好转染率越高，但精液的活力随洗涤程度下降而下降，从而影响转染率。 经液氮冻过的兔精子能吸附6-甲基诺丹明-6-dUTP标记的DNA，而且具有稳定性。经液氮冻过的精子与标记的DNA除了结合在精子头后部核区外，也能结合在精子头前部。经DNA Ⅰ酶消化后的转染率仍然很高，说明经液氮冷冻后，外源DNA进入精子内部的机率提高。 附睾精子与射精的精液经洗涤后的精子都能够吸附6-甲基诺丹明-6-dUTP标记DNA。本实验还对附睾精子和射精精子结合外源DNA情况的比较，发现附睾精子与射精的精液经洗涤后的精子都能够吸附外源DNA，且二者的差异不显著。本实验还对比了射精精子与附睾精子结合DNA后作单精注射后胚胎的发育情况，发现二者在阳性胚胎率上没有显著差别，射精精子与附睾精子的卵裂率分别是21.6％和23％，差异不显著(P＜0.05)，转GFP基因阳性率分别为15.5％和16.5％，差异不显著(P＜0.05)。 在单精注射实验中由于受到诸如卵子外颗粒细胞的去除、机械穿刺、在卵中导入精子培养液、操作液等使卵的成活率大大降低，另外与精子结合的外源DNA如果大量表达也可能对胚胎造成伤害。由于这些因素使的影响，胚胎成活率降低。实验中阳性胚胎的比率为28.6％至44％。虽然用结合了GFP基因的精子作单精注射的卵胚胎发育率较低，但阳性胚胎占发育胚胎的比率很高，这在生产实践中有很高的应用价值。