【摘 要】
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目的:观察Cdk1蛋白表达及其活性对肝癌细胞凋亡的影响。方法:克隆Cdk1基因质粒和Cdk1siRNA,并将其转染到肝癌HepG2细胞中。另外应用roscovintine (Cdks的抑制剂)刺激细胞,然
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目的:观察Cdk1蛋白表达及其活性对肝癌细胞凋亡的影响。方法:克隆Cdk1基因质粒和Cdk1siRNA,并将其转染到肝癌HepG2细胞中。另外应用roscovintine (Cdks的抑制剂)刺激细胞,然后给予紫外线(UV)照射。用Western Blot检测转染的Cdk1蛋白的表达,用核素标记测定其活性;用HO 33342(Hoechst 33342)的免疫荧光染色细胞核判断细胞凋亡的情况。分析Cdk1蛋白表达及活性对肝癌细胞凋亡的影响。结果: Cdk1可以在HepG2良好地表达;Cdk1siRNA可以有效地沉默Cdk1的表达;Roscovintine可抑制Cdk1的活性;细胞凋亡率在Roscovintine刺激细胞时的最高vs Cdk1转染细胞组和Cdk1siRNA转染细胞组(P<0.01),在Cdk1转染细胞高于Cdk1siRNA转染细胞组(P<0.01)和EV转染细胞组(P<0.05),在Cdk1siRNA转染细胞最低。结论:过度表达Cdk1可以增加肝癌细胞死亡,抑制肝癌的增殖。抑制Cdk1活性可更有效增加肝癌细胞死亡,抑制肝癌的增殖,因此,Cdk1可望成为肝癌治疗的新靶点。
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