胰岛素受体酪氨酸激酶底物(Insulin Receptor Tyrosine Kinase Substrate, IRTKS)是IRSp53家族的成员之一,已有的研究表明IRTKS参与了F-actin的结合和膜突出的形成。为了深入了解IRTKS的功能,我们对IRTKS的酪氨酸磷酸化修饰进行了解析,同时对IRTKS的泛素化及其降解进行了研究。我们发现不同的细胞系中IRTKS的酪氨酸磷酸化水平不同,并与细胞内的原癌基因c-Src有关,激活的Src能促使IRTKS发生酪氨酸磷酸化；利用Src的专一性抑制剂PP2直接抑制Src的激酶活性,或者用RNA干扰抑制Src蛋白表达,IRTKS的磷酸化明显减少甚至消失；免疫共沉淀实验表明Src和IRTKS存在相互作用；说明Src可能直接介导了IRTKS的酪氨酸磷酸化。利用IRTKS的缺失突变,我们发现IRTKS蛋白存在多个受Src激酶磷酸化的酪氨酸位点；进一步利用定点突变技术将IRTKS的酪氨酸突变为苯丙氨酸,我们找到了Src激酶介导IRTKS磷酸化的位点,IRTKS蛋白共有6个酪氨酸磷酸化位点,它们分别是Y37,Y156,Y163,Y274,Y293,Y439。另一方面我们的研究还表明,IRTKS具有促进细胞迁移的功能,干扰Src的表达可以抑制IRTKS促迁移能力,显示IRTKS的这种促迁移能力是Src依赖的。除了能被磷酸化之外,我们还发现IRTKS能被多聚泛素化修饰,IRTKS与E3泛素连接酶MDM2有相互作用,在MDM2过表达的细胞中IRTKS的降解速度明显加快,同时检测到IRTKS蛋白分子的多聚泛素化条带,表明MDM2可多聚泛素化IRTKS并导致其通过26S蛋白酶体降解；当活化的Src存在时,IRTKS被泛素化降解的几率减少,显示磷酸化的IRTKS可能在细胞内更加稳定。