多肽-纳米簇荧光传感器的设计合成及应用研究

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金纳米簇(AuNCs)作为新兴的荧光纳米材料,是由几个至一百个不等的金原子组建而成,其直径一般不到2 nm,同时具有孤立原子与纳米粒子的性质。贵金属纳米簇具有较强的光致发光、Stokes位移大、稳定性强等光学性质,已被广泛应用于环境、生物分析和医学诊断等多个领域。本文利用多肽-金属纳米簇和硫化镉(CdS)量子点之间的荧光共振能量转移(FRET),对食品添加剂偶氮类色素诱惑红、胰岛素以及凝血酶等生物大分子进行检测,主要研究内容如下:1.设计功能性多肽(CCYRGHDHCY)用来修饰金纳米簇(AuNCs),制备多肽-金纳米簇(peptide-AuNCs)荧光传感器,并对诱惑红进行定量检测。当诱惑红存在时,多肽中的氨基酸与诱惑红之间由于静电引力作用而相互吸附,发生电子转移,导致peptide-AuNCs大量团聚,造成体系的荧光猝灭。在浓度范围5-90μM内诱惑红浓度与荧光比率成良好的线性相关,线性方程为y=0.0164x+0.99073(R~2=0.998),检出限为0.667μmol/L。并应用该荧光传感器检测饮料样品中的诱惑红。2.以CdS量子点和功能性多肽-金纳米簇(CCYRRKRRHCY-AuNCs)作为供体和受体,基于二者之间的FRET设计了“turn on”荧光传感体系,并对胰岛素进行识别检测。通过体系荧光的猝灭和恢复,可以灵敏地检测胰岛素浓度,在20-500 ng/mL浓度范围内,胰岛素浓度与荧光恢复比率呈良好的线性关系,线性方程为y=12.359x+0.2591(R~2=0.996),检出限低至6.67 ng/mL,并应用该荧光传感体系对人体血清样品中的胰岛素进行筛查和定量检测。3.基于功能性多肽-银纳米簇(CCYRGWRGCY-AgNCs)和CdS量子点之间的FRET构建“turn on”荧光传感体系,并用于凝血酶的分析检测。凝血酶能够裂解精氨酸(R)和甘氨酸(G)间的肽键,从而与peptide-AgNCs特异性识别。凝血酶能够削弱peptide-AgNCs和CdS量子点间的FRET,通过体系荧光的猝灭和恢复,对凝血酶进行定量检测。在5-60 ng/mL浓度范围内凝血酶与荧光恢复比率呈良好的线性关系,线性方程为y=0.0591x+0.0691(R~2=0.997),检出限为1.67 ng/mL。该荧光传感体系可以满足现场快速筛查血清样品中凝血酶的需求。
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