川西獐芽菜、独一味和新疆大枣中有效成分的高效毛细管电泳分析

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本论文以中藏药为研究对象,采用高效毛细管电泳技术分别对川西獐芽菜、独一味、新疆大枣中的几种活性成分进行了分离测定,也为其它中藏药的质量标准研究奠定了一定的基础。论文内容主要包括以下几个部分:1分别介绍了高效毛细管电泳技术发展的历史、基本的原理、仪器的结构、分离的模式、进样技术、检测的方法及其联用技术。综述了近年来高效毛细管电泳技术在中藏药中的分析应用,并在此基础上归纳出本论文的研究内容和目的。2建立了高效毛细管电泳(CE)同时测定川西獐芽菜中龙胆苦苷及獐芽菜苦苷的方法。研究了运行缓冲液的浓度、pH、添加剂β-环糊精浓度、检测波长及分离电压对分离结果的影响。在最佳分离测定条件下,实现了川西獐芽菜中龙胆苦苷和獐芽菜苦苷的快速分离检测。结果得出龙胆苦苷和獐芽菜苦苷分别在9.375-150μg/mL、6.252-100μg/mL范围内线性关系良好,r值分别为0.9997和0.9998,加样回收率分别为99.74%和99.58%,保留时间RSD值分别为6.7%和5.1%,峰面积的RSD值分别为1.98%和2.43%。从结果可以看出本方法简便、快速、重现性好,适用于含有龙胆苦苷、獐芽菜苦苷类药物成分的检测。3采用毛细管区带电泳实现了对川西獐芽菜及其制剂中齐墩果酸、熊果酸、槲皮素、芹菜素的同时分离测定。最终优化的条件是:50mmol/L硼砂盐磷酸盐缓冲液(pH9.5),5mmol/L β-CD,15kv分离电压,柱温20℃,检测波长250nm,5s进样时间(电压20psi)条件。在优化的条件下,齐墩果酸,熊果酸,槲皮素和芹菜素具有良好的线性关系(r>0.9991)其最低检测限(LOD)分别为0.3415,0.2003,0.0062,0.2538μg/mL,相对标准偏差均不超过3.79%。从结果可以看出该方法准确度好,灵敏度高,可以作为同时测定川西獐芽菜中齐墩果酸、熊果酸、槲皮素、芹菜素的分析方法。4建立了一种有效而简单往缓冲溶液中添加修饰剂β-CD的方法,实现了苯乙醇苷四种水解苷元的同时分离测定。在最佳的β-CD浓度下,通过毛细管电泳紫外检测(UV),在不到20min内,实现了对四种苯乙醇苷苷元的分离测定。检测限浓度低至103mg/L。并且在测定过程中考察了缓冲溶液的pH值,运行缓冲液的离子强度,分离电压及进样时间等。在优化的条件下,成功实现了对供试品独一味四种苷元的测定,证明了该方法的有效性和实用性。5建立高效毛细管电泳(CE)同时测定大枣中环磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素的方法。研究了运行缓冲液的浓度、pH、添加剂β-环糊精浓度、检测波长及分离电压对分离结果的影响。在最佳分离测定条件下,三个化学成分得到快速分离检测。环磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素分别在16.5~529.4mg/L、5.5~176.4mg/L、8.8~282.4mg/L范围内线性关系良好,r值分别为0.9998、0.9998和0.9997,加样回收率分别为97.31%、95.62%和94.88%,保留时间的RSD值分别为6.7%、5.1%和5.3%,峰面积的RSD值分别为4.5%、5.8%和4.2%。结果表明本方法简便、快速、重现性好,适用于含有环磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素类药物成分的检测。
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