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目的:
促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)是一种缺氧诱导分泌的具有促造血作用的激素,近年来的研究发现,对缺血再灌注损伤的心肌组织,EPO具有良好的保护作用。能够抑制心肌细胞凋亡,保存缺血心肌的ATP水平,抗炎及促进心肌血管增生,其部分分子机制与抑制糖原合成激酶3β,活化PI-3K/Akt,PKC,ERK1/2,线粒体ATP依赖的钾通道。本实验目的是探讨EPO预处理对缺血再灌注的大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)表达的影响及其可能的机制。
材料与方法:
SD大鼠,体重230±10g,,雌雄不拘,由中国医科大学附属盛京医院动物实验中心提供。EPO由沈阳三生药业有限公司生产。24只大鼠随机平均分为三组,每组8只:假手术组,对照组,EPO组。腹腔注射10%乌拉坦麻醉,0.6ml/100g,气管插管,小动物呼吸机机械通气,电极插入四肢皮下记录心电图,由左侧2-4肋间开胸暴露心脏,在左心耳及肺动脉圆锥间结扎左冠脉前降支,心电图显示ST段抬高为建模成功。假手术组左冠脉下只穿线不结扎,EPO组及对照组缺血30分钟再灌注2小时。2小时后取下心脏,分离左心室于-80℃保存。RT-PCR方法分析左心室心肌组织HSP70mRNA和ERKmRNA的表达,并用相关分析分析HSP70mRNA和ERK1/2mRNA的表达量的相关关系。实验结果均用均数±标准差(x±s)来表示,采用统计软件SPSS13.0进行数据分析。
结果:
1、与假手术组(0.083±0.017)相比,EPO组(0.850±0.066)及盐水对照组(0.355±0.043)HSP70均显著升高,P<0.01。与盐水对照组相比,EPO组HSP70显著升高,P<0.01。与假手术组(0.044±0.010)组比较,EPO组(1.150±0.125)及盐水对照组(0.576±0.116)ERK1/2mRNA表达水平显著升高,P<0.01;与盐水对照组比较,EPO组ERK1/2mRNA升高显著,P<0.01。
2、EPO预处理组大鼠的心肌组织HSP70mRNA表达量与ERKmRNA表达量呈显著正相关(r=0.965,P<0.01)
结论:
1、EPO预处理能够促进缺血再灌注心肌组织HSP70的表达。
2、EPO预处理能够诱导缺血再灌注心肌组织ERK1/2的表达增加,加强心肌的内源性保护作用。
3、HSP70表达可能是ERK1/2通路介导的。