【摘 要】
：
在临床多药耐药菌感染的治疗中,碳青酶烯类药物作为少数有效药物之一,具有重要的地位。而近年来,介导对碳青酶烯类抗生素耐药的blaNDM基因在全球范围内广泛流行,在食品动物中也出现了blaNDM阳性细菌的报道;作为人类肉类食品的来源,食品动物中blaNDM基因的流行给食品安全和人类健康带来了巨大风险。本研究以山东省一个养鸡场,以及广东省一个兽医站、一个养鸡专业合作社和两个养鸡场的家禽为研究对象,对bl
【基金项目】
：
“十三五”国家重点研发计划（2016YFD0501300）畜禽重要病原耐药性检测与控制技术研究；
论文部分内容阅读
在临床多药耐药菌感染的治疗中,碳青酶烯类药物作为少数有效药物之一,具有重要的地位。而近年来,介导对碳青酶烯类抗生素耐药的blaNDM基因在全球范围内广泛流行,在食品动物中也出现了blaNDM阳性细菌的报道;作为人类肉类食品的来源,食品动物中blaNDM基因的流行给食品安全和人类健康带来了巨大风险。本研究以山东省一个养鸡场,以及广东省一个兽医站、一个养鸡专业合作社和两个养鸡场的家禽为研究对象,对blaNDM基因在家禽大肠杆菌中的流行状况和传播特征进行了调查研究。在2016年～2017年间,从山东省某养鸡场采集了35份器官样本,从广东省某兽医站A、养鸡专业合作社B、养鸡场C和养鸡场D分别采集了182、87、63、103份器官样本,对其筛查blaNDM阳性细菌;结果表明,五处来源样品的blaNDM基因阳性率分别为20.0%（7/35）、14.3%（26/182）、1.1%（1/87）、3.2%（2/63）和0%（0/103）。采用PCR和一代测序方法进行blaNDM基因的分型和其它耐药基因的检测,并进行了药敏试验。结果表明,blaNDM-1、blaNDM-5和blaNDM-9阳性菌株分别占3.3%、72.7%和24.2%;其它种类β-内酰胺类耐药基因、mcr-1、fos A3和PMQR基因阳性率分别为93.9%、30.3%、51.5%、69.7%,其它种类β-内酰胺类耐药基因以blaTEM（72.7%）和blaCTX-M（63.6%）阳性率较高。33株菌对氨曲南耐药率为48.5%,对其它β-内酰胺类药物,以及四环素、多西环素、氯霉素、氟苯尼考、环丙沙星、复方新诺明、甲氧苄啶的耐药率均高于93.0%,对庆大霉素、替加环素、黏菌素、和阿米卡星耐药率则较低,分别为36.4%、18.2%、33.3%和6.1%。采用PFGE分型、MLST分型、Southern blot杂交、接合转移以及复制子分型等方法,探究大肠杆菌中blaNDM基因的传播特点以及质粒特征。结果表明,blaNDM基因以水平传播为主,但在小范围内也存在垂直传播;所有大肠杆菌的blaNDM基因均定位于质粒上,质粒大小从45～400 kb不等,复制子类型包括Inc X3、Inc B/O/K/Z、Inc Y、Inc HI2、Inc I1以及Inc X1-FIB（K）、Inc I1-HI2等7种类型。87.9%的blaNDM阳性质粒可接合,接合转移频率从7.59×10-6～1.93×10-2不等。blaNDM阳性质粒以可接合的bla NDM-5阳性Inc X3型质粒为最多（60.6%,20/33）。为探究blaNDM阳性质粒对宿主菌适应性的影响,对8种典型blaNDM阳性质粒的转化子和接合子进行了质粒稳定性试验、生长曲线试验和竞争试验。结果表明,本研究中所有blaNDM阳性质粒在大肠杆菌宿主中存在均较稳定,两种Inc X3型质粒和Inc Y型质粒对宿主菌适应性基本无影响,两种Inc B/O/K/Z型质粒以及Inc I1型质粒可增强宿主菌的适应性,但Inc HI2型和Inc I1-HI2杂合型质粒使宿主的适应性有一定降低。为了进一步探究blaNDM基因转移的分子机制,选取了部分blaNDM阳性质粒进行了测序和分析。结果表明,本研究中的blaNDM基因环境类型主要为IS26-Intl1-dfr A2-hp-aad A2-qac E△1-sul1-hp-ISCR1-dct-tat-trp F-ble MBL-bla NDM-ISAba125-IS26,以及△umu D-△Tn2-IS3000-△ISAba125-IS5-△ISAba125-bla NDM-ble MBL-trp F-tat-△dct-IS26-△umu D两种,前者存在于Inc B/O/K/Z质粒中,而后者主要存在于Inc X3质粒中。此外,本研究发现了一种新的blaNDM转移结构IS3000-△ISAba125-IS5-△ISAba125-blaNDM-ble MBL-trp F-tat-△dct-IS26-△umu D-hp-△ISL3-IS3000。IS26和IS3000等移动元件对bla NDM基因的传播起到了促进作用。本研究表明,blaNDM阳性大肠杆菌在不同养殖单位的家禽中流行状况可能差异较大,部分养殖单位流行可能较为严重;其传播以可接合质粒介导的水平传播为主,其次为小范围的垂直传播。blaNDM阳性大肠杆菌往往携带多种耐药基因,多药耐药现象严重。多种blaNDM阳性质粒适应性特征有助于blaNDM基因的进一步传播和扩散。家禽中blaNDM大肠杆菌的出现和流行,揭示了blaNDM基因在养殖动物中进一步传播和流行的风险,提示需要进一步加强食品动物源碳青霉烯类耐药菌株的监测和研究。
其他文献
传统印度辣木（Moringa oleifera Lam.）为辣木科（Moringaceae）辣木属（Moringa）多年生落叶木本植物。起源于印度北部,广泛分布于热带和亚热带国家,我国主要集中引种栽培在海南、两广、云南、四川和福建等地。辣木生长速度快,其叶富含蛋白质、各类维生素、矿物质（钙、钾、铁）、氨基酸等成分。因此,利用辣木枝叶作饲料可有效缓解我国蛋白质饲料资源紧缺的现状,提高畜禽动物产品的产
火炬松是广东省松树商品林中一种综合利用价值较高的经济树种,富含优质的松脂。产脂量已成为火炬松当前遗传改良阶段的重要目标性状之一。本研究以23年生火炬松第一代种子园自由授粉子代26个家系和5年生的火炬松嫁接株为材料。选择经过基因芯片技术初步筛选确认的9个与产脂性状相关的候选基因（BT-10-B1、BD-2-B9、BT-14-C2、BD-2-D3、BD-3-E8、BT-3-F9、BT-10-F12、B
黄梁木（Neolamarckia cadamba）又名团花树,隶属茜草科（Rubiaceae）团花属（Neolamarckia）常绿大乔木,广泛分布于东南亚和我国华南地区。黄梁木不仅能作为用材树种,同时具有药用价值,有治疗眼睛感染、皮肤疾病、消化不良以及牙龈出血、口腔炎、咳嗽、发烧、贫血和胃痛等一系列药理功能。基因表达分析在生命科学的众多研究领中已被广泛应用,在发现和预测新的基因及其功能、了解基因
β-地中海贫血（β-Thalassemia）是由于人类β珠蛋白基因发生突变,以致用以合成血红蛋白的β珠蛋白肽链合成减少或者完全不能合成,导致红细胞内α珠蛋白肽链和β珠蛋白肽链比率失衡,使得红细胞溶解速率加快的一种遗传性溶血性血红蛋白病。目前,只有极少数患者进行与之相匹配的造血干细胞移植才能获得有效治疗,大多数病患只能通过输血治疗来减缓病程的发展,但易造成铁超载而使得机体脏器及内分泌腺等严重受损。β
杜鹃三节叶蜂Arge similis Vollenhoven（Hymenoptera:Argidae）,主要危害杜鹃科（Ericaceae）植物,国内外对此虫研究很少。本研究从杜鹃三节叶蜂幼虫分龄,生物生态学特性,短时高温和饲养密度对幼虫、蛹生长发育的影响,成虫对寄主植物挥发物的电生理反应等方面对杜鹃三节叶蜂进行了研究,旨在为今后防治方法的研究提供理论支持。通过对幼虫头壳宽、体宽和体长的测量试验研
生物体在有氧代谢过程中会产生活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）。在正常情况下,活性氧的产生和抗氧化过程之间存在着平衡。然而,当生物体处于不良环境,例如高温,生物体中活性氧大量产生导致氧化损伤程度增加并引起氧化应激（Oxidative Stress,OS）。在长期进化中,生物体产生了由非酶类和酶类抗氧化物质组成的复杂防御系统。其中,过氧化氢酶（Catalase,CAT）
土栖白蚁在地下建筑巢穴和蚁道,与土壤及土壤微生物的关系密切。此前的研究表明,木腐菌对白蚁具有吸引作用。然而,土壤真菌与白蚁的关系尚未研究。此外,在设置地下诱饵装置诱集白蚁时发现,白蚁常将土搬运到诱饵装置内,但白蚁这一行为的生物学意义尚不清楚。针对以上问题,本文对土壤及土壤微生物对土栖白蚁行为的影响进行了研究。主要内容包括:（1）土壤真菌（木霉）对两种白蚁影响的研究:采用双向选择性试验,用商品化的哈
目标快速自动检测与精准识别是计算机视觉领域重要的基础性课题,也是当前家畜智能化养殖的核心技术之一,及时精准定位和识别奶牛个体是后续单产水平、疾病预警、养殖效益以及福利水平等智能分析的重要基础。本论文以开放复杂环境下的奶牛为对象,构建深度学习模型,开展牛脸自动检测与识别研究。具体内容如下:（1）基于不同图像采集设备（如数码相机、手机等）收集整理不同养殖环境、季节、天气、时段、批次奶牛生理活动期的数据
现有的宏微驱动通常采用宏驱动与微驱动相互独立和叠加的方式,使用音圈电机和压电电机共同驱动,引起系统体积庞大、结构复杂、不易集成化,因此需要在前人研究的精密定位系统的基础上,研究一种结构简单、易于集成的新型精密定位系统。V型超声电机起制动特性快、输出功率大、无电磁干扰和断电自锁等优点,与现有宏微驱动控制平台比较也具有体积小、结构简单、易于集成化和控制等特点。鉴于此,本文利用V型超声电机作为研究对象,
本试验研究饥饿和再投喂两个生理过程中虎龙斑幼鱼生长、非特异性免疫及肠道微生物变化情况。采用单因子实验设计,设试验组（饥饿-再投喂）和对照组（正常投喂）,每组设置3个重复,每个重复30尾鱼,饲喂平均初始体质量为（74.16±12.08g）的虎龙斑60天,其中前30天为饥饿期,试验组鱼体进行饥饿处理,对照组鱼体保持正常饱食投喂,后30天为恢复投喂期,试验组鱼体恢复投喂30天,对照组鱼体仍保持饱食投喂。