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研究背景：肿瘤流行病学研究表明，肝癌是威胁人类生命的恶性疾病，具有极高的发病率和死亡率。目前放疗、化疗以及手术切除治疗是其主要的治疗手段，但存在治疗敏感性较差，复发率高等缺点。因此，寻找有效的治疗手段和防治复发的方法是医学界亟待解决的问题。有报道显示，半胱氨酸天冬氨酸酶-3（cysteine-aspartic proteases，caspase-3）激活诱导的凋亡细胞释放的降低前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2），刺激周围极少数存活肿瘤细胞的大量增殖，从而引起肿瘤复发。研究表明，黄连素（berberine,BER）能够通过caspase非依赖途径诱导肿瘤细胞的凋亡，这提示黄连素具有抑制肿瘤生长、同时避免引起肿瘤复发的潜在作用。但黄连素抑制肿瘤复发的药理作用还未见报道。研究目的：阐述黄连素对肝癌发生及复发的抑制作用及机制，评价黄连素应用于临床治疗肝癌并防治肝癌复发的可能性，为临床肝癌治疗药物的选择提供理论基础。研究内容：MTT法检测黄连素对细胞增殖及复发的抑制作用；流式细胞仪检测黄连素诱导细胞凋亡情况；Western blot方法检测细胞中caspase-3、半胱氨酸天冬氨酸酶-9（cysteine-aspartic proteases，caspase-9）、磷脂酶A2（cytosolicphospholipase A2，cPLA2）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、凋亡诱导因子（apoptosis-inducing factor，AIF）的表达；酶催化底物试剂盒检测细胞的caspase-3活性情况；酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）方法检测培养上清液中花生四烯酸（arachidonic acid，AA）、PGE2的含量。研究结果：1.黄连素对HepG2肝癌细胞增殖抑制作用黄连素可抑制HepG2细胞增殖；各剂量黄连素对HepG2细胞的caspase-9、caspase-3的蛋白表达均无影响，对caspase-3的活性也无影响；黄连素上调细胞核中AIF蛋白表达水平；黄连素降低HepG2细胞的cPLA2、COX-2蛋白表达；黄连素升高细胞培养上清液中AA含量，降低PGE2含量，升高AA和PGE2浓度比值。2.黄连素对HepG2肝癌细胞复发抑制作用黄连素可抑制VP-16诱导的凋亡细胞（feeder细胞）引起的HepG2细胞复发，对PGE2直接刺激的HepG2细胞增殖无影响；黄连素对feeder细胞caspase-3的蛋白表达和活性均有抑制作用；黄连素降低feeder细胞的cPLA2、COX-2蛋白表达；黄连素升高feeder细胞培养上清液中AA含量，降低PGE2含量，升高AA和PGE2浓度比值。结论：黄连素具有诱导肝肿瘤细胞HepG2凋亡的作用；黄连素诱导肿瘤细胞凋亡的机制可能与抑制花生四烯酸代谢通路、激活AIF介导的caspase非依赖途径有关；黄连素具有抑制肝肿瘤细胞HepG2复发的作用；黄连素抑制肝肿瘤复发的机制可能与抑制PGE2释放有关。