低聚木糖对断奶仔猪肠道微生态区系的影响

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本论文研究了低聚木糖(Xylo-oligosaccharide,XOS)及低聚木糖与抗生素合用对断奶仔猪肠道微生态区系的影响,以及对断奶仔猪生长性能、免疫水平、小肠粘膜组织结构及肠道菌群结构的影响;并运用菌落计数法、荧光定量法(Q-PCR)及PCR-DGGE法研究了低聚木糖对断奶仔猪肠道菌群影响的可能作用机制,为低聚木糖作为抗生素替代品在畜禽饲料中的应用提供科学依据。 试验1选用(21±1)日龄健康的断奶[杜×(长×大)]三元杂仔猪(平均体重约7kg)28头,首先随机取4头作为断奶前处理组(A组),将剩余仔猪随机分为4个处理组,各处理组间仔猪体重差异均不显著,每个处理3个重复,每个重复2头。试验分组情况如下,空白对照(C组),饲喂玉米.豆粕型基础日粮;阳性对照组(B组),饲喂基础日粮+长效土霉素碱(OTC)20ppm+磺胺二甲嘧啶(SM2)40ppm;低聚木糖组(D组),饲喂基础日粮+低聚木糖(XOS,纯度95%)100ppm;合用组(E组),饲喂基础日粮+低聚木糖(XOS,纯度95%)100ppm+长效土霉素碱(OTC)20ppm+磺胺二甲嘧啶(SM2)40ppm。试验仔猪于试验开始第1d、14d清晨空腹称重,计算日增重,详细记录试验期间仔猪采食量、计算料重比,同时记录试验仔猪腹泻率;分别于试验开始和结束时,前腔静脉采血,测定血清IgG含量和仔猪血液T淋巴细胞亚群。试验结果表明:与A组相比,空白对照组仔猪血清IgG含量变化不明显(P>0.05),各T淋巴细胞亚群含量有下降趋势(P>0.05)。与空白对照相比,B组、D组仔猪血清IgG含量分别降低11.83%和9.93%,E组仔猪血清中IgG含量上升3.72%。B组、D组和E组仔猪血液CD3+、CD4+及CD4+/CD8+均有升高趋势。 试验2动物屠宰试验:在试验1的基础上分别于正试期第1d、14d,从各处理每个重复组抽取1头仔猪屠宰,分别测定仔猪空肠、回肠、盲肠及结肠内容物pH;另取十二指肠中段、空肠中上段和回肠中段各约2cm,制备组织切片,测定各肠段绒毛长度(V)和隐窝深度(C),并计算肠腺比(V/C)。结果表明:1)与A组相比,空白对照组仔猪肠道pH变化不显著(P>0.05),断奶两周后仔猪各肠段粘膜结构均有一定程度的损伤,且回肠粘膜形态结构损伤程度最大,空肠次之,十二指肠最小。与空白对照组相比,B组、D组和E组仔猪结肠pH显著降低。pH(PH<0.05),回肠粘膜损伤有改善趋势。 试验3肠道内容物菌群的研究:采用菌落计数法对肠道内容物中乳酸杆菌和大肠杆菌进行活菌计数;采用Q-PCR方法对各肠段内容物中乳酸杆菌(Lac)和大肠杆菌(E.coli)进行绝对定量;采用PCR-DGGE方法研究不同肠段内容物菌群结构的变化。试验结果表明:1)菌落计数法测定结果表明,与空白对照组相比,A组仔猪小肠各段内容物乳酸杆菌数和L/E值均升高,大肠杆菌数有下降趋势;空肠各细菌数的变化幅度高于回肠;XOS组、XOS与抗生素合用均可以提高仔猪空肠和回肠内容物L/E值,且合用组提高显著。2)Q-PCR法测定结果表明,与空白对照组相比,A组仔猪各肠段容物中各细菌数变化不显著(P>0.05);XOS组、XOS与抗生素合用组有提高仔猪空肠内容物中大肠杆菌数,降低乳酸杆菌数和L/E值的趋势;仔猪回肠内容物中大肠杆菌数、乳酸杆菌数及L/E值均有升高趋势;XOS组有降低仔猪盲肠和结肠内容物L/E值的趋势;而XOS与抗生素合用有降低断奶仔猪盲肠和结肠内容物中大肠杆菌数,提高乳酸杆菌数和L/E值的趋势。3)PCR-DGGE法对断奶仔猪各肠段菌群H统计分析表明,与A组相比,C组仔猪空肠和回肠内容物菌群H均有升高的趋势,盲肠和结肠内容物菌群H显著提高(P<0.05)。日粮中单独添加XOS对断奶仔猪空肠、回肠和盲肠内容物H均表现为降低趋势,对结肠内容物H影响不明显;XOS与抗生素合用有提高断奶仔猪空肠和回肠内容物菌群H的趋势,显著提高仔猪结肠内容物菌群H(P<0.05)。相似性分析及聚类分析表明,在各肠段,A组与其它各组的菌群结构差异均比较大。在空肠、回肠和盲肠,D组和E组在系统树中距离较近,两组仔猪空肠、回肠和盲肠菌群结构相似。在结肠,E组单独聚类,E组仔猪结肠菌群结构与其他各组仔猪结肠菌群结构有较大差异。
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