有性生殖中,胚胎的形成始于精卵结合。由于哺乳动物精卵细胞体积的悬殊及精子发生、成熟过程中特有的形态及细胞成分的变化,长久以来广泛认为在受精及胚胎早期发育过程中,精子仅仅提供受精所需的雄性来源DNA。随着近年对精子生殖功能的深入探索,已有迹象表明精子DNA和RNA在男性生育功能方面可能存在同样重要的调控作用。为研究精子DNA和RNA对男性生育功能及其进行辅助生育技术的影响,进行了下列研究：应用精子染色质结构完整性检测(SCSA)的方法检测育龄男性精子DNA损伤,指标分别为DNA碎片指数(DFI)和高DNA着色性(HDS),探讨吸烟对育龄男性精子质量,尤其是精子DNA损伤的影响。该研究发现吸烟≥20支/日和吸烟年限≥10年的患者组精液量、前向运动精子比例低于且精子畸形率显著增高(P<0.05)；吸烟组与非吸烟组相比,平均DFI(11.6±8.9% VS 9.3±8.4%)和HDS值(13.6±11.2 VS 7.8±9.1%)均有上升(P<0.05)。提示吸烟≥20支/日和吸烟年限≥10对精子DNA完整性和核成熟度有不良影响。比较精子DNA不同损伤程度对各项辅助生育技术治疗结局的影响。将DFI正常阂值设为≤27%,HDS正常阈值设为≤15%。按以下标准分别分组比较,组1为DFI≤27%且HDS≤15%,组2为DFI>27%且HDS≤15%,组3为DFI≤27%且HDS>15%,组4为DFI>27%且HDS>15%。IUI治疗周期中,与组1相比,组2和组3患者妊娠率有降低趋势,但各组比较妊娠结局未达到统计学意义；ROC(受试者工作曲线)显示DFI>20.6%或HDS>35.5%时,进行IUI治疗获得妊娠的可能性<5%。精子DFI>27%的男性进行IVF助孕时,受精率、可用胚胎率和新鲜周期移植后妊娠率没有明显降低,但优质胚胎率明显下降；其day3的胚胎碎片程度增加。精子HDS>15%的男性进行ICSI助孕时,受精率低于正常组男性,但其可用胚胎率、优质胚胎率及新鲜周期移植后妊娠率没有明显降低。三种方式中精子DFI和HDS指标同时异常者均未获得妊娠,提示DFI和HDS联合指标对男性生育力的预测价值可能更大。通过对人精子RT-PCR的研究表明,精子细胞特异表达的新基因hssp411在男性精子mRNA中存在多态性,两种异构体在不同男性精子中的表达存在差异,约有90%的男性精子mRNA中有异构体5的表达；仅有10%的男性基因异构体5缺失表达；两种异构体在同一男性精子中的表达量也存在差异,异构体5占主导,其mRNA表达量大大高于异构体4；hssp411基因组体外重组表达研究发现,尽管hssp411 mRNA有两种异构体存在,但最后的蛋白表达仅有一种(异构体5的表达产物),因此精子mRNA中是否有异构体5的表达可能是男性不育的一个分子标志,可为男性不育的病因诊断提供新的思路。原发性纤毛运动障碍(primary ciliary dyskinesia, PCD)是一种基因突变造成的纤毛运动障碍性疾病。患者精液表现无或极少活动精子,须借助ICSI技术获得后代,但其受精率很不稳定。我们通过透射电镜诊断7例PCD男性,均存在纤毛超微结构异常；通过热点基因测序,寻找突变位点,发现5例PCD患者在编码外动力臂的DNAH5基因中存在相同的突变位点248315G→C,这是国内外尚未报道的；对8个ICSI周期的妊娠结局和精子质膜完整性及精子来源的相关性进行分析。4个周期使用自然射精,3个周期使用TESA精子,还有1个周期同时采用自然射精和TESA精子进行授精。8个周期总共获得成熟的MⅡ卵子73枚,平均受精率为46.6%(34/73)。所有ICSI周期都获得了至少1枚可用胚,但只有5个周期有优质胚胎,其中有3个周期获得了临床妊娠。因此,我们认为,ICSI是目前治疗PCD伴男性不育患者的唯一有效的方法且PCD患者精子质膜完整性可能与其ICSI治疗结局相关,精子质膜完整性检测可以实现对PCD患者的初筛,有可能发展成为PCD患者精子质量评价的常规方法,用来预测PCD患者ICSI治疗的成功率。