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目的：本实验通过建立裸鼠结肠癌肝转移模型,研究在上调Twist基因表达后对HT-29结肠癌细胞侵袭转移能力的影响,探究Twist基因和上皮-间质转化机制的相关标志物N-cadherin、Vimentin和E-cadherin在上皮-间质转化现象中的表达及其与结肠癌进展、转移之间的关联。方法：使用重组质粒pTracer-CMV/BSD-Twist和阴性对照质粒pTracer-CMV/BSD转染并经杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选得到稳定转染的人HT-29结肠癌细胞系。采用脾脏原位注射法建立裸鼠结肠癌肝转移模型,实验共分为三组：实验组(转染上调Twist表达质粒组)、阴性对照组(转染空质粒组)、空白对照组(未转染组)。注射30天后获取各组裸鼠肝脏和脾脏标本,应用荧光实时定量PCR, Western blot和免疫组织化学染色法检测裸鼠肿瘤组织的Twist和EMT相关分子标志物N-cadherin, Vimentin和E-cadherin的mRNA和蛋白表达情况,并分析各指标的变化。结果：1.成功建立裸鼠异种结肠癌肝转移模型,病理检查结果符合结肠癌肝转移特点。实验组脾脏原位肿瘤较阴性对照组及空白对照组大小相近,肝脏转移肿瘤转移灶数目多于阴性对照及空白对照组,肿瘤大小未见明显差异。2.实验组与阴性对照和空白对照组相比,肿瘤组织的Twist, N-cadherin和(?)Vimentin分子的mRNA转录水平(9.9082±0.9137,2.431±0.1636,3.0310±0.2026)和蛋白表达水平(0.9916±0.0508,0.9417±0.1025,0.7231±0.0218)明显升高(P<0.05)；E-cadherin mRNA转录水平和蛋白表达水平显著降低(0.4531±0.0536,0.71±0.0613),差异具有统计学意义(P<0.05)。阴性对照组与空白对照组相比,Twis、N-cadherin、Vimentin和E-cadherin分子的mRNA转录水平和蛋白表达水平均无显著差异(P>0.05)。3. Twist基因mRNA表达水平在肝脏转移瘤组织较脾脏原位种植瘤组织中表达升高(P<0.05),差异具有统计学意义。4.免疫组织化学染色结果显示实验组肝、脾脏肿瘤细胞Twist, N-cadherin和Vimentin染色阳性细胞数多于阴性对照及空白对照组(P<0.05), E-cadherin染色结果显示实验组肝、脾脏肿瘤细胞E-cadherin染色少于阴性对照及空白对照组(P<0.05)。结论：1.本研究成功建立裸鼠结肠癌肝转移模型,其操作安全、成瘤率较高,对结肠癌肝转移的基础与临床研究均具有应用价值。2.在稳定转染高表达Twist基因质粒的HT-29结肠癌细胞株,通过体内实验,可增强间充质标记物N-cadherin, Vimentin mRN A及蛋白的表达水平,降低上皮标志物E-cadherin mRNA及蛋白的表达水平,促进上皮-间充质转化,逆转间质-上皮转化。3.在体内实验中肝脏转移灶肿瘤的Twist基因mRNA转录水平较脾脏原发部位肿瘤升高,证明Twist基因能够促进上皮-间充质转化过程,增强肿瘤的远处侵袭及转移能力。4.通过转染高表达Twist质粒的HT-29细胞促进结肠癌在体内的侵袭、迁移,提示转录因子Twist在肿瘤上皮-间充质转化中具有重要作用,可作为肿瘤基因治疗的有效靶点加以利用,并为对转移性结直肠癌及时、有效地进行干预以及对结直肠癌侵袭转移机制的进一步研究提供了新的思路。