目的：通过体外培养自身免疫卵巢早衰小鼠调节性T细胞的生成,观察补肾活血汤含药血清对CD4+CD25+Treg细胞的增殖作用。方法：以A/J雄鼠和C57BL/6雌鼠进行杂交繁殖,成功获得健康的B6AF1小鼠。筛选性周期正常的30只雌性小鼠,随机分2组：其中模型组20只,正常组10只。模型组小鼠经尾根和左后脚掌皮下注射ZP3多肽进行自身免疫性卵巢早衰小鼠造模,每只小鼠多点注射总量为0.1ml(由pZP3+CFA混合而成)。造模2周后,从模型组和正常组中各取6只小鼠,眼球取血后ELISA测定血清E2含量；取胸腺、脾脏、子宫及双侧卵巢标本,予以称重后计算脏器指数；阴道脱落细胞巴氏染色及子宫与卵巢HE染色后观察组织形态学变化来综合来评判造模成功情况。选择Wistar大鼠8只,随机分为空白对照组、补肾活血汤高、中、低剂量组,每组2只。空白对照组大鼠给予双蒸水(20 ml/kg),中药组分别予以补肾活血汤高、中、低剂量(20g/kg、10g/kg、5g/kg)予以灌胃。第7天给药后1h经腹主动脉采血,取得含药血清。免疫磁珠法分离脾脏CD4+CD25+Treg,流式细胞术检测纯度后以相应的含药血清培养。CCK-8法及CFSE标记细胞检测CD4+CD25+Treg增殖情况。结果：1、造模后,根据小鼠脏器指数、血清E2水平及子宫卵巢组织病理的变化,显示免疫性卵巢早衰小鼠模型建立成功。2、各实验组对CD4+CD25+Treg的增殖均有作用,含药血清组较PBS组显著升高。中剂量血清组增殖作用又强于低、高剂量中药血清组,且P<0.01,差异有显著统计学意义。结论：补肾活血汤含药血清对CD4+CD25+Treg增殖具有明显促进作用。