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[目的] 本研究旨在研究中药小复方芩黄合剂治疗中高危B细胞淋巴瘤的临床疗效、安全性和作用机制。 [方法] 第一部分:芩黄合剂治疗中高危弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的随机对照临床研究 选择未经治疗的初发中高危弥漫性大B细胞淋巴瘤患者。采用单中心、随机、安慰剂对照的前瞻性研究方法，以芩黄合剂颗粒剂联合R-CHOP化疗组与单纯R-CHOP化疗组对照，并按中医辨证原则分为痰瘀互结型和气血两虚型。观察完全缓解率(CR)和客观缓解率(Objective Response Rate，ORR)，功能状态卡式评分(Kanofsky)，不同中医证型间的疗效差异，以及安全性指标。 第二部分芩黄合剂对化疗过程中弥漫大B细胞淋巴瘤患者免疫功能的影响 采用单克隆抗体荧光标记检测和流式细胞技术，检测化疗过程中外周血T细胞免疫、NK细胞的变化;采用速率散射比浊法检测外周血清免疫球蛋白的变化。 第三部分芩黄合剂通过PI3K/AKT通路增强阿霉素抑制人B细胞Burkitt淋巴瘤荷瘤鼠肿瘤的作用机制初步探讨 建立了人B细胞淋巴瘤Namalwa细胞株皮下移植瘤裸鼠模型。然后分别用芩黄合剂(Qinhuang Granule)、阿霉素(doxombicin，DOX)与芩黄合剂联合DOX治疗，观察对肿瘤生长的抑制作用;通过免疫组化(IHC) SP法，检测肿瘤免疫抗原CD20、CD79a、CD10、Bcl6、MUM1、BCL-2的表达，PI3K/AKT信号通路中的关键分子p-AKT和p-mTOR蛋白的表达，自噬相关蛋白LC3的表达;通过透电显微镜观察细胞的超微结构变化。 [结果] 第一部分:芩黄合剂治疗中高危弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的随机对照临床研究1.终期评估，两组总CR率达84.6％(55/65)，芩黄合剂联合化疗组（芩黄组）93.9％(31/33)，单纯化疗组（对照组）75％(24/32)，两组比较p＜0.05;两组总ORR率93.8％(61/65)，其中芩黄组97.0％(32/33)，对照组90.6％(29/32);疾病进展PD4例（QH组1例、对照组3例）。中期评估CR率分别为81.8％(27/33)和56.3％(18/32)，两组比较p＜0.05; ORR率分别为100％(33/33)和96.9％(31/32); PD1例出现在对照组。 2.Ann ArborⅢ期病例的CR率芩黄组90.9％(10/11)，对照组28.6％(2/7)，p＜0.05;Ⅲ期和Ⅳ期病例合并比较，93.8％(15/16)对50％(7/14)，p＜0.05。GCB与non-GCB分层比较无差异，P＞0.05。 3.≥60岁的老年患者，芩黄组与对照组的CR率分别是100％(10/10)、84.6％(11/13)，＜60岁的年轻患者中aaIPI=1的两组CR率非常接近，90.9％(10/11)、90.0％(9/10)，P＞0.05;而aaIPI≥2的高危患者，芩黄组CR率明显优于对照组，分别为91.7％(11/12)与44.4％(4/9)，p＜0.05。 4.KPS较差（70和80分）的患者中芩黄组CR率95.7％(22/23)高于对照组73.1％(19/26)，且KPS治疗后总体改善显著优于对照组，p＜0.05。 5.芩黄组痰瘀互结型16例CR、1例PD，气血两虚型15例CR、1例PR;对照组痰瘀互结型15例CR、2例PR，气血两虚型9例CR、3例PR、3例PD。芩黄组气血两虚型患者治疗后总体疗效显著优于对照组，P＜0.05。 6.总体不良反应发生率芩黄组为66.7％(22/33)，对照组为78.1％(25/32);芩黄组共发生147人次不良反应，对照组发生198人次，两组间比较，p＜0.05;芩黄组所有及3-4级非血液毒性均显著小于对照组，P＜0.05。两组均无严重不良事件发生。 第二部分芩黄合剂对化疗过程中弥漫大B细胞淋巴瘤患者免疫功能的影响 1.全组CD3+总T细胞绝对计数在治疗过程中明显下降，P＜0.05; CD3+细胞相对值(％)治疗中呈现出明显上升，P＜0.05;两组间无差异。 2.CD3+CD4+T细胞绝对计数和相对值(％)在治疗过程中呈进行性的显著下降，对照组治疗后较治疗前下降明显，p＜0.05;而芩黄组下降不明显，P＞0.05。 3.CD3+CD8+T细胞绝对计数无显著变化，相对值(％)呈进行性上升，p＜0.05;对照组治疗后上升程度显著高于芩黄组，p＜0.05。 4.CD4+/CD8+细胞绝对计数比值在治疗过程中进行性显著下降，p＜0.05，对照组在治疗后CD4+/CD8+比值出现倒置现象。 5.CD4+CD28+相对值(％)在治疗后下降显著，p＜0.05;芩黄组下降不显著，P＞0.05;而对照组治疗后下降显著，p＜0.05。 6.CD8+CD28+相对值(％)在治疗过程中明显上升，p＜0.05;芩黄组上升显著，p＜0.05，而对照组上升不明显，P＞0.05。 7.CD4+CD45RA+相对值(％)在治疗过程中进行性下降，p＜0.05;对照组治疗后较芩黄组下降更明显，p＜0.05。 8.CD4+CD45RO+相对值(％)两组治疗过程中差异不明显，P＞0.05。 9.CD3+CD69+相对值(％)与CD3+HLA-DR+相对值(％)在治疗过程中进行性上升，p＜0.05;芩黄组明显上升，p＜0.05，而对照组上升不明显，P＞0.05。 10.全组免疫球蛋白（IgG、IgA、IgE和IgM）治疗中、治疗后较治疗前均出现显著下降，p＜0.05; IgE下降最明显，依次为IgE＞IgM＞IgA＞IgG;两组间比较无差异，P＞0.05。 11.全组NK细胞相对值(％)治疗后较治疗前明显上升，p＜0.05;两组间比较无差异，P＞0.05。 第三部分芩黄合剂通过PI3K/AKT通路增强阿霉素抑制人B细胞Burkitt淋巴瘤荷瘤鼠移植瘤的作用机制初步探讨 1.1.3g/kg芩黄合剂ig×14d联合5mg/kg DOX ip d1、d7，对Namalwa细胞裸鼠异种移植瘤的抑瘤率为90.1％，高于单用5mg/kg DOX阳性对照组的79.4％和单用1.3g/kg芩黄合剂组的40.1％，P＜0.05。 2.从光镜形态及免疫组化分析显示Namalwa移植瘤组织符合Burkitt淋巴瘤细胞特征，IHC显色呈CD20+、CD79a+、CD10+、Bcl6-、MUM1+/-，符合B细胞NHL滤泡生发中心来源特征。Bcl-2强阳性表达。 3.IHC结果显示，联合治疗明显抑制了PI3K/AKT信号通路中的关键分子p-AKT和p-mTOR和Bcl-2蛋白的表达;芩黄合剂对p-AKT蛋白表达的抑制作用强于DOX;芩黄合剂抑制p-AKT的作用强于p-mTOR。 4.电镜结果表明:Namalwa移植瘤组织内部结构紊乱，肿瘤生长过程中伴随细胞凋亡的发生，并出现大量巨噬细胞，在对照组几乎观察不到自噬现象。芩黄合剂治疗组见细胞凋亡现象增多，而化疗组坏死现象突出，联合治疗组肿瘤细胞凋亡、坏死现象均明显增多，并可观察到自噬现象。 [结论] 1.芩黄合剂增加了R-CHOP方案治疗初发中高危DLBCL的疗效，更早取得完全缓解。 2.芩黄合剂提高了aaIPI=2-3的年轻高危患者及Ann ArborⅢ/Ⅳ期患者的CR率。 3.芩黄合剂提高了整体功能状态KPS较差患者的CR率。 4.芩黄合剂提高了气血两虚型患者的总体疗效。 5.芩黄合剂减轻了化疗的毒副反应，尤其是非血液性毒性。 6.芩黄合剂对CD3+CD4+Th细胞、CD4+CD28+、CD4+CD45RA+细胞都有保护作用，同时促进了CD3+CD69+早期活化T细胞的激活过程。 7.芩黄合剂增强了阿霉素对人B细胞Burkitt淋巴瘤Namalwa细胞裸鼠移植瘤的抑制作用。 8.芩黄合剂增强阿霉素对Namalwa细胞裸鼠移植瘤PI3K/AKT信号通路中的关键分子p-AKT、p-mTOR及Bcl-2蛋白的抑制作用。 9.芩黄合剂抑制p-AKT的作用强于p-mTOR，芩黄合剂对p-AKT蛋白表达的抑制作用强于DOX。 10.芩黄合剂增强了DOX化疗诱导的自噬产生。