目的随着人们生活方式的改变和生活节奏的加快,精神压力不断增加,卵巢储备功能下降发病率日益增加,且有低龄化的趋势,中医学对治疗卵巢储备功能下降,恢复卵巢功能有着较好的疗效及独特优势,本研究拟在既往研究的基础上,以肾虚作为本病的基本病机,以中医补肾填精理论为指导,采用归肾丸治疗卵巢储备功能下降,并通过动物实验探讨归肾丸治疗本病可能的作用机制,旨在为中医药治疗本病提供进一步的科学依据,提供更多的治疗思路及临床经验。方法①本研究选取2013年3月至2014年11月就诊于湖北省中医院妇产科门诊的44例病例作为研究对象,符合卵巢功能储备下降的西医诊断标准和中医辨证分型属肾虚型标准,予以归肾丸口服,在月经周期第5天(闭经的患者在任意一天)开始服用,连续服用14天为一个疗程,共治疗3个月经周期,其中4例患者在治疗过程中妊娠,故仅对40例患者的结果进行分析研究,采用自身治疗前后对照的方法,比较、分析治疗前和治疗3个月经周期后的中医症状评分、总积分、月经改善情况以及血清性激素检查结果。②为进一步证实归肾丸治疗本病的疗效,进行了进一步的动物实验研究,通过观察归肾丸对卵巢储备功能下降小鼠一般情况、动情周期、卵巢指数、原始卵泡数目及体内生殖激素水平的影响,观察归肾丸对卵巢储备功能下降小鼠卵巢功能的影响,探讨归肾丸防治卵巢功能减退的可能作用机制。结果(1)临床观察:①经治疗后,有4例患者妊娠,对40例患者结果进行分析,其中痊愈5例,显效10例,有效21例,无效4例,总体有效率为90%,调经总有效率达92.5%;②患者治疗后总积分明显下降,,腰骶酸痛、头晕耳鸣、潮热、失眠多梦、神疲乏力、性欲减退等临床症状也得到较大改善;③采用归肾丸治疗后,患者FSH、LH水平及FSH/LH比值比治疗前明显下降。④治疗后血常规、粪常规、心电图、肝肾功能检测均无显著异常变化,治疗过程中亦无患者出现恶心呕吐或其他不良反应。(2)动物实验:①给药治疗后,各组小鼠情况均慢慢有所改善,进食增加,逐渐恢复正常,毛发较柔顺有光泽;各治疗组小鼠体重与模型组相比均有所上升,且差异具有统计学意义(P<0.05),归肾丸各剂量组与补佳乐组之间比较无明显差异(P>0.05),归肾丸各剂量组组间比较未见明显差异(P>0.05)。②造模及治疗后,与正常组相比,模型组小鼠卵巢指数明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),各治疗组未见明显变化(P>0.05);各治疗组与模型组比较,模型组小鼠卵巢指数下降,差异有统计学意义(P<0.05);归肾丸各剂量组与补佳乐组未见明显差异(P>0.05),归肾丸各剂量组组间比较未见明显差异(P>0.05);造模及治疗后,各组小鼠的子宫指数无明显变化(P>0.05)。③造模及治疗后,除归肾丸低剂量组外,其余各治疗组与正常组相比性周期未见明显差异(P>0.05);各治疗组与模型组比较治疗组性周期明显缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);归肾丸低剂量组与补佳乐组、归肾丸中、高剂量组比较性周期明显延长,差异具有统计学意义(P<0.05),归肾丸中、高剂量组与补佳乐组比较无明显差异(P>0.05)。④造模后各组小鼠卵巢原始卵泡数目较正常组明显减少,具有统计学差异(P<0.05)。归肾丸低剂量组与模型组相比,原始卵泡虽然有所增加,但其差异不具有统计学意义(P>0.05),其他各治疗组与模型组比较,原始卵泡数量均明显增多,具有统计学差异(P<0.05),归肾丸各剂量组与补佳乐组之间无明显变化(P>0.05)。⑤造模及给药后,与正常组相比,模型组AMH水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组AMH水平未见明显差异(P>0.05);与模型组相比,各治疗组小鼠FSH值下降,AMH值升高,差异均有统计学意义(P<0.05),归肾丸各剂量组与补佳乐组之间无明显变化(P>0.05);归肾丸低剂量组、AMH值低于归肾丸中、高剂量组,其差异均有统计学意义(P<0.05)。结论归肾丸通过补肾填精的方法,在改善腰骶酸痛、潮热、失眠多梦、性欲减退等临床症状方面有着较好的疗效,同时在降低FSH值、提高AMH水平方面效果显著,且无任何不良反应发生。动物研究表明归肾丸能提高AMH水平,降低FSH水平,增加DOR小鼠原始卵泡数量,我们推测归肾丸可能是通过调节原始卵泡的启动、募集及生长来维持原始卵泡的休眠状态,从而达到恢复卵巢储备功能的作用。归肾丸是治疗卵巢储备功能下降有效、安全的治疗方法,值得临床推广应用。