黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus (Fisch.) Bge.的干燥根。黄芪一般在霜降前后地上部分枯萎时,或春季土壤解冻后植株萌芽前采挖,除去泥沙,去净残茎、须根,切下芦头,平铺于晒场进行晾晒,以晒至干透为度。目前市场上应用的黄芪多为栽培品,具有补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌等功效,广泛用于多种中成药及其制剂中。黄芪的主要有效成分为皂苷、黄酮、多糖等。黄芪中黄酮类等成分具有显著的抗氧化、促进细胞增殖作用。异黄酮类化合物具有雌激素样作用,黄芪异黄酮为黄芪的有效成分之一,有抗病毒、抗菌、降血脂、抗氧自由基等作用。目的：通过试验对黄芪药材进行研究,为科学评价与有效控制黄芪的质量提供依据。方法：含量测定方法的建立(1)提取条件：利用正交实验设计,从溶剂用量、提取时间、提取次数及不同溶剂的选用几个方面,对黄芪药材中毛蕊异黄酮的含量测定进行考察,选取适宜黄芪药材提取工艺。(2)色谱条件：选择合适的固定相、流动相、柱温等使毛蕊异黄酮苷色谱峰与其它杂质峰完全分离。(3)系统适用性试验：在第(2)步确定的色谱条件下,考察毛蕊异黄酮苷色谱峰的理论板数、分离度。(4)标准曲线的绘制：配制梯度浓度的毛蕊异黄酮对照品溶液,在选定的色谱条件下分别进样,根据不同浓度的对照品和各自对应的峰面积绘制标准曲线。(5)精密度试验：分别量取对照品溶液和供试品溶液按进样量2μl/次,各自连续进样6次,测定样品峰面积。(6)重复性试验：称取6份同批次黄芪药材粉末,制备供试品溶液,按进样量2μl/次,测定样品峰面积。(7)稳定性试验：配置对照品溶液和供试品溶液,分别于放置0,4,8,12,24,48h后进样,测定样品峰面积。(8)回收率试验：称取几份黄芪药材粉末样品,并计算各黄芪药材粉末中毛蕊异黄酮苷总量,分别加入等量的毛蕊异黄酮苷对照品,测定毛蕊异黄酮苷的含量,计算平均回收率和RSD值。(9)最低限检测的测定：逐步稀释毛蕊异黄酮苷对照品溶液,直到信噪比S/N≥3,此时的毛蕊异黄酮苷含量即为该方法的最低检测限。结果：(1)提取条件：确定了对黄芪进行含量测定的前处理工艺：50倍甲醇超声提取一次,提取时间为30 min。(2)色谱条件：采用W_aters C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)；流动相：甲醇：0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱；流速：0.3 ml/min;柱温设定为40℃；检测波长设定为268nm；进样量：2μl。在此色谱条件下,毛蕊异黄酮苷峰保留时间约为6min,分离度大于1.5,理论塔板数不低于4000。(3)标准曲线的绘制：经检测毛蕊异黄酮苷在0.0276～2.76μg范围内线性关系良好。回归方程为Y=317194X+12502,r=0.9999。(4)精密度试验：仪器和方法的精密度良好,RSD分别为2.43%、3.61%。(5)重复性试验：样品的重复性良好,RSD为0.64%。(6)稳定性试验：对照品和样品在48 h内均稳定,RSD分别为2.53%、3.11%。(7)回收率试验：样品平均回收率为99.14%,RSD为2.19%。(8)毛蕊异黄酮苷的最低检测限为20.213ng。结论：以毛蕊异黄酮苷含量为其主要质量指标,建立了该药材定量分析方法,该方法稳定性,重复性和精密度良好,为科学评价与有效控制黄芪的质量提供了科学依据。