CyclinD1,CDK2,CDK4在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及与细胞周期相关性的探讨

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目的:探讨增生性瘢痕(hypertrophicscar, HS)在不同时期成纤维细胞(Fibroblast, FB)中细胞周期蛋白CyclinDl及细胞周期蛋白激酶CDK2和CDK4基因及蛋白的表达与同时期FB所处的细胞周期的相关性,为细胞周期相关基因的干预用于HS的防治提供前期理论依据。方法:采集32例HS(以HS时段分为3个月组、6个月组、1年组、2年组各8例),并以8例正常皮肤作为对照组。利用实时荧光定量PCR法、蛋白质免疫印迹(Western blotting)法检测HS及正常皮肤中CyclinD1, CDK2, CDK4的mRNA、蛋白表达水平;用流式细胞术检测HS中FB的细胞周期情况。结果:FB中CyclinD1, CDK2, CDK4的mRNA及蛋白质表达量值在3个月组、6个月组、1年组、2年组分别为:CyclinDl 14.17±1.5、0.74±0.16; 13.30±1.12、0.71±0.08;9.73±1.01、0.46±0.08;9.09±0.97、0.43±0.05;CDK2为15.41±1.56、0.77±0.16;15.14±1.12、0.73±0.07;8.53±1.87、0.39±0.03;7.98±0.77、0.35±0.04;CDK4为19.71±2.04、1.95±0.21;12.04±1.32、0.79±0.08;7.90±1.27、0.32±0.06;7.75±0.17、0.29±0.09。CyclinDl, CDK2mRNA和蛋白的表达,3与6个月组比较差异无统计学意义(P>0.05);3、6个月组分别与1、2年和正常组比较表达差异有统计学意义(P<0.05);1、2年和正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。CDK4的mRNA和蛋白的表达,3个月组高于6个月组(P<0.05);3、6个月组分别与1、2年和正常组比较表达明显升高(P<0.05);1、2年和正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示3、6个月HS中细胞主要分布在S、G2/M期;而1、2年组HS及正常皮肤中的细胞多处于G0/G1期。结论:随着HS的发展,FB中CyclinDl,CDK2,CDK4mRNA和蛋白的表达强度呈由强至弱的变化。不同时期HS的FB中CyclinDl,CDK2,CDK4各自的mRNA和蛋白的表达趋势基本一致,而且HS中细胞成分的细胞周期分布与这两个蛋白所执行的功能情况相对应;在增生性瘢痕发生早期对这两个基因进行干预,有可能会较好控制增生性瘢痕的发生及发展。
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