本文利用免疫学和分子生物学手段对我国三种养殖经济扇贝，栉孔扇贝（Chlamys farreri）、海湾扇贝（Argopecten irradians）和虾夷扇贝（Mizuhopecten yessoensis）热休克蛋白 70（Heat Shock Protein 70， HSP70）的诱导表达和基因序列进行了研究。 应用免疫印迹法（Western immunoblotting），对高温刺激条件下，栉孔扇贝不同组织中 HSP70 的表达进行了检测。实验结果显示，热休克可以使扇贝鳃组织中 HSP70 的表达明显升高，但在肌柱、外套膜、性腺中未检测到 HSP70 表达的变化。 论文首次将 FCM 技术引入扇贝血淋巴细胞 HSP70 表达的研究。2003 年五月，应用流式细胞术（flow cytometry，FCM)对几种逆境因子（高温、低温、细菌感染、水质恶化）作用下，栉孔扇贝血淋巴细胞中 HSP70 的表达进行了初步的研究。实验数据的 t 检验分析结果表明，几种逆境因子对 HSP70 的诱导表达有十分显著的作用（自由度为 8，P<0.01）。各处理组显著性分析的结果表明（Duncan 检验）：当水质 COD 为 8.36 时，污染水环境对扇贝的胁迫已接近于肌柱注射 20μl 鳗弧菌（Vibrio anguillarum）菌液（109cells/ml）的胁迫程度；在相同的?t 条件下，热休克对扇贝 HSP70 诱导表达的效果比冷休克更为显著。 2003 年 10 月，应用 FCM 对栉孔扇贝、虾夷扇贝、海湾扇贝在热休克、冷休克条件下 HSP70 的诱导表达进行监测和比较。t 检验分析结果表明，热休克、冷休克对扇贝 HSP70 诱导表达的效果十分显著（自由度为 8，P<0.01）。Duncan 检验结果表明：在相同的?t 条件下，热休克、冷休克对海湾扇贝 HSP70 诱导表达的差异性十分显著；但对栉孔扇贝、虾夷扇贝 HSP70 诱导表达的差异性不显著。栉孔扇贝春季和秋季实验结果的差异，反映出栉孔扇贝热胁迫阈值有随季节变化而变化的现象。采用FCM 对热休克条件下扇贝血淋巴细胞中 HSP70 表达量进行跟踪监测，结果显示，高温刺激后，扇贝血淋巴细胞中 HSP70 的表达量逐渐升高，在诱导 7h 后达到最高，其后逐渐下降。 1<WP=4>曲凌云 三种养殖扇贝热休克蛋白 HSP70 在逆境因子下的表达和相关基因的克隆 博士学位论文 利用 PCR，3’-RACE 和 5’-RACE 技术，克隆了虾夷扇贝、海湾扇贝 HSP70的基因序列（Partial Sequence Genbank Accession Number：AY435154，AY435155）。其中虾夷扇贝蛋白质编码区（coding sequence CDS）全长为 2071bp，编码 657 个氨基酸；海湾扇贝 CDS 全长为 2077bp，编码 659 个氨基酸；两种扇贝 HSP70 氨基酸序列有 92.7%的同源性。