OLIG1对人少突胶质细胞瘤鉴别诊断意义的实验研究

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目的 脑原发肿瘤一般都被认为是胶质细胞起源的。然而,从细胞形态或根据一些传统的标记物很难区分开肿瘤是由星形胶质细胞、少突胶质细胞或它们的前体细胞组成的;这就造成了临床上对脑肿瘤诊断的困难。据最新关于中枢神经系统肿瘤基因的报道,在一些调节胶质细胞发育的因子中发现了一种负责编码一种helix-loop-helix转录因子的新的分子标记—OLIG1/2,它能启动硫酸软骨素蛋白多糖阳性的胶质细胞前体的形成。在啮齿动物中枢神经系统中,这个基因只在少突胶质细胞或它们的前体细胞中表达。我们通过实验证明OLIG1基因只在人少突胶质瘤细胞中大量表达,而在星形胶质细胞中不表达或表达量很少。从而证明其在临床诊断上的重要意义。 方法 取星形胶质细胞瘤、少突胶质细胞瘤、胶质母细胞瘤及正常脑组织共30例标本,各制成切片3份,两份石蜡切片用作原位杂交;一份HE染色送作病理诊断,以和最后的原位杂交结果作对照。原位杂交试剂盒和探针均由Invitrogen公司合成提供。原位杂交结束后,用光学显微镜观察结果,照相。观察指标:数5个以上高倍视野,不少于1000个细胞(胞核为紫蓝色),计数阳性细胞数(胞浆为棕褐色)。根据阳性细胞数的多少可分为6个等级-/+++++(-为阴性,+为弱阳性,+++++为强阳性)。以此来判断OLIG1基因的有无及量的多少。 结 果 确诊为少突胶质瘤的13例标本中10例为十以上的阳性表达(占 77%人* 例星形胶质瘤中有 2例标本为十阳性问6.7%人胶质母细胞瘤和正常脑组织均为阴性结果。经统计分析/检验对<O.皿5,有显著意义。上述结果证明了0*0基因只在人少突胶质瘤细胞中大量表达,而在星形胶质瘤细胞或正常脑组织中不表达或表达量很少。 结 论 虽然少突胶质瘤与其他胶质瘤在生物学行为方面差别较大,全切以后的愈后不同,对放疗和化疗的敏感性也不同,但对它们的组织病理学诊断却很困难,因为现在还没有有价值的分子标志物来区分开少突胶质瘤和星形胶质细胞瘤。WHO的最新公布的胶质瘤的分类方法,依然是根据形态学的特征即肿瘤中的星形胶质细胞和少突胶质细胞来分类分型的。这种检查和分类的方法很大程度上依赖主观的判断而不是客观的指标。成熟的少突胶质细胞的特殊的标记蛋白如髓壳基本蛋白、髓壳相关蛋白、髓壳蛋白脂蛋白等在少突胶质细胞中表达量很少而无法检测。星形胶质细胞标记物如胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及S-lbop在星形胶质细胞和少突胶质细胞中都有不同水平的表达,它们对于星形胶质瘤的诊断有意义,然而对于少突胶质瘤则不然。本项实验通过对OLIGI基因的原位杂交来检测只在少突胶质细胞里大量表达的OLIGI InRNA,从而对少突胶质瘤进行有客观指标的诊断,因此可以区分少突胶质瘤和星形胶质瘤。故本实验对人少突胶质细胞瘤鉴别诊断有重要意义。
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