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本试验以大白菜“北京80号”、“油青矮脚45天菜心”、“四季菜心王”为试材,以带柄子叶为外植体,研究了不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂浓度对白菜类作物不定芽再生的影响,建立了白菜类作物较高再生频率的再生体系。采用农杆菌介导法将质粒pBⅠBast-gus-intro分别导入“油青矮脚45天菜心”、“四季菜心王”,利用GUS组织染色分析法研究了根癌农杆菌菌液浓度、侵染时间、预培养时间和共培养时间等因素对菜心带柄子叶遗传转化的影响,探讨了适宜菜心遗传转化的膦化麦黄酮、卡那霉素和抑菌抗生素的使用浓度,优化了农杆菌介导的遗传转化体系。以建立的遗传转化体系为基础,采用农杆菌介导法将不育基因orf138和orf222导入菜心。主要研究结果如下:1.建立了白菜类作物子叶高频再生体系:‘北京80号’的最佳培养基为MS+5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+2mg/LAgNO3,再生频率为84.1%;“油青矮脚45天菜心”和“四季菜心王”的最佳培养基为MS+0.2mg/LTDZ+1mg/LNAA+2mg/LAgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。三个基因型的带柄子叶在0.51mg/L2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。45d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的浓度以12g/L为宜。2.优化了农杆菌介导的遗传转化体系:菜心转化过程中以膦化麦黄酮和卡那霉素为筛选剂,最适浓度分别为10mg/L和8mg/L;抑菌剂选用500mg/L的羧苄青霉素;用OD600=0.8的农杆菌侵染10-15分钟;预培养3d,共培养2d。3.构建了线粒体定位表达载体PBⅠ121-ATPβ-orf138/orf222。4.利用农杆菌介导的遗传转化法分别将不育基因orf138、orf222导入菜心中,转化频率分别达2.6%和3.1%。