激光诱导荧光检测器用于生物胺检测研究

来源 :齐齐哈尔大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:wuzhen16885168
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激光诱导荧光检测器(LIFD)是目前用于检测化学及生物样品的最灵敏检测技术之一,广泛用于高效液相色谱(HPLC)、微柱液相色谱(Micro-LC)及毛细管电泳(CE)等分离领域。在生物胺的衍生及分离过程中,首先对LIFD的检测灵敏度及其线性关系进行测试;其次,液体样品前处理方法的探讨研究;研究衍生温度、缓冲液pH、衍生反应时间等因素对生物胺衍生化的影响和色谱条件中流动相、温度的影响,并用于饮料中生物胺的测试。本文采用异硫氰酸荧光素(FITC)作为柱前衍生试剂,对饮料中的生物胺衍生化,采用Sinochrom ODS-BP C18(5μm,4.6mm×200mm)色谱柱,高效液相色谱(HPLC)与激光诱导荧光检测器(LIFD)联用技术,对衍生产物进行检测。以衍生产物的稳定性、线性范围和重复性为检测指标,结果表明:(1)对激光诱导荧光检测器在不连接色谱柱情况下的性能指标进行测试,结果显示检测限为:7.55×10-15mol/L;检测灵敏度:1.29×10-12mV/mol/L;线性范围:大于104。(2)实验中采用液-液萃取(LLE)的方法,对饮料样品的中生物胺进行萃取。选用氯化钠为萃取用盐,在pH=11的碱性条件下,用乙酸乙酯进行萃取取得良好效果。(3)本文对衍生条件进行了优化,在pH=9.0、恒温50℃下衍生反应18h条件下,以异硫氰酸荧光素(FITC)作为衍生试剂,对生物胺进行测定。并且成功用于饮品中生物胺的定性分离,其色谱条件:流动相为甲醇:水=7:3,流速1mL/min。
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