miR-155抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞生物学特性的影响

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背景:骨肉瘤作为最常见的原发性恶性成骨性肿瘤,其侵袭能力强且有早期转移倾向。骨肉瘤多发生于儿童和青少年,其最常见的原发部位为股骨远端、胫骨近端及肱骨近端,其中一半始于膝关节周围,严重影响机体功能。随着医学技术的发展,在骨肉瘤的治疗中,尽管出现了外科保肢技术和联合化疗方案等新的综合治疗方案,但其5年生存率仍只有65-70%。在过去的20多年,骨肉瘤的治疗进入了瓶颈期,骨肉瘤的复发和转移问题始终未得到解决。鉴于骨肉瘤现状,我们急需找到新的有前景的骨肉瘤治疗手段。MicroRNAs(miRNAs)作为一类真核生物体内具有调控功能的非编码小RNA,它们能在转录后水平调控基因表达,miRNAs被报道在许多肿瘤中表达异常,且异常表达的miRNAs与肿瘤的进展密切相关。根据miRNAs在肿瘤中的不同作用,它们被人为分成癌基因和抑癌基因两大类。作为miRNAs家族成员,miR-155在许多肿瘤中过表达,且过表达的miR-155在这些肿瘤的进展中起到癌基因作用。本实验室在行骨肉瘤SOSP-9607细胞系miRNAs克隆时,检测到miR-155存在,提示miR-155在骨肉瘤中也可能存在促进作用。目的:观察miR-155抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞增殖、侵袭、迁移、周期和凋亡的影响。方法:1.实验分为3组:实验组、阴性对照组和空白对照组。实验组转染miR-155抑制物来抑制miR-155的功能。2.MTT和CCK-8实验测定3组细胞24、48、72和96小时OD值,并绘制成生长曲线。3.Transwell实验测定3组细胞的侵袭和迁移能力。4.流式细胞仪观察3组细胞的周期和凋亡变化。结果:1.MTT和CCK-8实验结果显示:两对照组间细胞增殖能力未见明显差异;而相对于对照组,实验组细胞增殖能力明显下降(P<0.01)。2.Transwell实验结果显示:两对照组间细胞侵袭和迁移能力未见明显差异;而相对于对照组,实验组细胞侵袭和迁移能力明显下降(P<0.05)。3.流式细胞仪周期结果显示:与对照组相比,实验组细胞G0/G1期细胞比率明显增高,而S期和G2期细胞比率明显降低(P<0.01);而两对照组间细胞的周期分布未见明显差异。4.流式细胞仪凋亡结果显示:实验组细胞凋亡率(8.5±0.4)%较阴性对照组凋亡率(1.2±0.3)%和空白对照组凋亡率(1.1±0.2)%明显增高(P<0.01);而两对照组间细胞凋亡率无明显差异。结论:通过转染miR-155抑制物抑制miR-155的功能后,对骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移、周期和凋亡等生物学特性产生了显著影响。
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