【摘 要】
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目的研究颗粒蛋白前体(Progranulin,PGRN)在滋养层细胞侵袭、凋亡中的作用,为理解子痫前期的发病机制提供理论依据。方法取子痫前期患者胎盘组织,测定其中PGRN mR NA和蛋白表
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目的研究颗粒蛋白前体(Progranulin,PGRN)在滋养层细胞侵袭、凋亡中的作用,为理解子痫前期的发病机制提供理论依据。方法取子痫前期患者胎盘组织,测定其中PGRN mR NA和蛋白表达。选择广泛应用于子痫前期的三种细胞系JEG-3、BeWo、JAR以及人原代培养的滋养层细胞,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验确定PGRN在这几种细胞中的表达情况,选择一种最佳细胞系。利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰该细胞系中PGRN表达,用qPCR、Western blot实验确定干扰或过表达有效后,分别通过Transwell侵袭实验和流式细胞术测定PGRN差异表达对滋养层细胞侵袭和凋亡的影响,同时在分子水平测定侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、-9和凋亡蛋白Caspase-3的表达及活性。结果在BeWo滋养层细胞中,干扰PGRN表达后,其侵袭能力减弱,凋亡增加。分子水平上,MMP-2、MMP-9活性减弱,Caspase-3裂解量增加。结论PGRN能够促进滋养层细胞侵袭和抑制细胞凋亡,通过上调PGRN可能减少子痫前期的发生和发展。
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