慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以不完全可逆的气流受限为特征的疾病状态,气流受限通常是进行性的,并伴有肺组织对有毒颗粒或气体的异常炎症反应。炎症反应在COPD发病中起关键作用。激素和茶碱用于COPD的抗炎治疗效果并不满意。西洛司特是一种新的选择性PDE4抑制剂,具有抑制中性粒细胞、肺泡巨噬细胞(AM)、CD8+T淋巴细胞等活化的作用。目前的临床研究已显示西洛司特对COPD患者的临床症状和肺功能有一定程度的改善,体外实验中也观察到西洛司特可抑制某些炎性介质和细胞因子的释放。本研究将重点观察西洛司特在体内及体外对COPD患者某些炎性介质和细胞因子的影响,验证其抗炎活性,进一步为COPD的临床治疗提供依据。方法:本研究分体外实验和体内实验两个部分。第一部分为体外实验:从9位COPD患者BALF中分离的AM与不同浓度的西洛司特、氨茶碱和甲基强的松龙共培养24小时,用ELISA的方法检测不同浓度不同药物作用下AM分泌LTB4和IL-6的水平;从12位COPD患者外周血中分离的单个核细胞(PBMC)与不同浓度的西洛司特、氨茶碱和甲基强的松龙共培养24小时,用ELISA的方法检测不同浓度不同药物作用下PBMC分泌IL-8和TNF-α的水平。第二部分为体内实验:31例COPD患者被随机分配到西洛司特治疗组(西洛司特 15mg,Bid,×24wk)和对照组(安慰剂 15mg,Bid,×24wk),用ELISA的方法检测治疗前后诱导痰中LTB4和IL-6水平。结果:一、西洛司特对AM分泌LTB4、IL-6的影响1.对LTB4的影响 三种浓度的西洛司特(0.1μM、1μM、10μM)对AM分泌LTB4呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。三种浓度的氨茶碱(5μg/ml、15μg/ml、25μg/ml)对AM分泌LTB4也呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。但三种浓度的甲基强的松龙(0.05μM、0.10μM、0.15μM)对AM分泌LTB4均无显著抑制作用。1μM的西洛司特可使LPS刺激AM活化分泌的LTB4减少48%,15μg/ml的氨茶碱可使其减少32%,两者比较有显著性差异(p<0.01)。 <WP=9>2.对IL-6的影响 三种浓度的西洛司特(0.1μM、1μM、10μM)对AM分泌IL-6呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。三种浓度的氨茶碱(5μg/ml、15μg/ml、25μg/ml)对AM分泌IL-6也呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。但三种浓度的甲基强的松龙(0.05μM、0.10μM、0.15μM)对AM分泌IL-6均无显著抑制作用。1μM的西洛司特可使LPS刺激AM活化分泌的IL-6减少45%,15μg/ml的氨茶碱可使其减少33%,两者比较有显著性差异(p<0.05)。二、西洛司特对PBMC分泌IL-8、TNF-α的影响1.对IL-8的影响 三种浓度的西洛司特(0.1μM、1μM、10μM)对PBMC分泌IL-8呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。三种浓度的氨茶碱(5μg/ml、15μg/ml、25μg/ml)对PBMC分泌IL-8也呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。但三种浓度的甲基强的松龙(0.05μM、0.10μM、0.15μM)对PBMC分泌IL-8均无显著的抑制作用。1μM的西洛司特可使LPS刺激PBMC活化分泌的IL-8减少54%,15μg/ml的氨茶碱可使其减少39%,两者比较有显著性差异(p<0.01)。2.对TNF-α的影响 三种浓度的西洛司特(0.1μM、1μM、10μM)对PBMC分泌TNF-α呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。三种浓度的氨茶碱(5μg/ml、15μg/ml、25μg/ml)对PBMC分泌TNF-α也呈显著的浓度依赖性抑制作用(p<0.01)。但三种浓度的甲基强的松龙(0.05μM、0.10μM、0.15μM)对PBMC分泌TNF-α均无显著的抑制作用。1μM的西洛司特可使LPS刺激PBMC活化分泌的TNF-α减少51%,15μg/ml的氨茶碱可使其减少32%,两者比较有显著性差异(p<0.01)。三、西洛司特治疗对COPD患者诱导痰中LTB4、IL-6的影响1.对LTB4的影响 治疗24周后,西洛司特治疗组患者诱导痰中LTB4水平显著降低(p<0.01),对照组患者治疗前后LTB4水平无显著差异。2.对IL-6的影响 治疗24周后,西洛司特治疗组患者诱导痰中IL-6水平显著降低(p<0.01),对照组患者治疗前后IL-6水平无显著差异。结论:西洛司特在体外可显著地抑制AM分泌LTB4和IL-6,抑制PBMC分泌IL-8和TNF-α,而甲基强的松龙却没有这种抗炎作用。COPD患者口服西洛司特治疗也可显著降低诱导痰中LTB4和IL-6的水平。以上结果提示,西洛司特具有显著的抗炎活性,具有临床治疗COPD的应用前景。